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血清鐵測定試劑盒說明書

閱讀:2321          發(fā)布時(shí)間:2011-8-29
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血清鐵測定試劑盒說明書 50T
一、原理:
在酸性溶液和還原劑的作用下,,使運(yùn)鐵蛋白中鐵與蛋白分離,,使血清中的高鐵還原成亞鐵,后者與雙吡啶結(jié)合成粉紅色的絡(luò)合物,,在一定范圍內(nèi),,鐵離子的多少與色澤成正比。
二,、試劑的組成與配制
1,、100mg/L鐵標(biāo)準(zhǔn)貯備液:1ml 溶液一瓶,4℃保存3個(gè)月,。
   2mg/L鐵標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)用液的配制:取鐵標(biāo)準(zhǔn)貯備液0.2ml加蒸餾水定溶至10ml, 4保存,。
2、鐵顯色劑:2號(hào)甲粉劑一支,,2號(hào)乙粉劑一支,,二號(hào)丙液100ml×1瓶,4℃保存6個(gè)月,。
用時(shí)將甲,、乙二粉劑倒入丙液中,充分混勻,,溶解,,即為鐵顯色劑,4℃避光保存,。
三,、操作表:

 
空白管O
標(biāo)準(zhǔn)管S
測定管U
蒸餾水(ml)
0.5
 
 
2mg/L鐵標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)用液(ml)
 
0.5
 
血清 (ml)
 
 
0.5
鐵顯色劑(ml)
1.5
1.5
1.5

混勻后,沸水浴5分鐘,,(空白及標(biāo)準(zhǔn)管可以不煮),,冷卻后離心,3500轉(zhuǎn)/分,,離心10分鐘,,取上清液1.0ml,0.5cm光徑,波長520nm,雙蒸水調(diào)零,,測各管吸光度OD值,。
四、計(jì)算與舉例:
1,、 計(jì)算公式:
血清鐵(mg/L)=×標(biāo)準(zhǔn)濃度(2mg/L)
血清鐵(umol/L)=×標(biāo)準(zhǔn)濃度(35.81umol/L)
*標(biāo)準(zhǔn)管鐵含量為2000ug/L,鐵原子量為55.847,,所以標(biāo)準(zhǔn)管鐵含量為35.81umol/L
2,、舉例:
   取血漿0.5ml按操作表進(jìn)行血清(漿)鐵測定,在520nm處,,0.5cm光徑,,測定各管吸光度為:空白管0.000,標(biāo)準(zhǔn)管0.038,,測定管0.037,,則計(jì)算如下:
   血清鐵(umol/L)=×標(biāo)準(zhǔn)液濃度=×35.81=34.87(umol/L)

五、注意點(diǎn):
1,、 玻璃器材需嚴(yán)格清洗,,避免鐵的污染,建議用一次性塑料試管,。
2,、 若上清渾濁,可再用另一試管再次離心后比色,。

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