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恒遠文獻:垂直振動對大鼠腰椎小關節(jié)退變及骨密度影響的實驗 研究
閱讀：286 發(fā)布時間：2020-4-2垂直振動對大鼠腰椎小關節(jié)退變及骨密度影響的實驗研究
劉博1 高天君2* 馬遠征2 王亮2 黎立2
1． 河北北方學院,，河北 張家口 0750002． jie放軍第 309 醫(yī)院,，北京 100091
中圖分類號: Ｒ681. 5 + 3 文獻標識碼: A 文章編號: 1006-7108( 2016) 10-1246-05
摘要: 目的 觀察大鼠腰椎小關節(jié)突在不同振動頻率下關節(jié)軟骨退變程度及腰痛相關因子的表達情況,，同時探究振動對骨密度的影響,。方法 收集對照組和振動組( 振動組接受 15 min/ d,，頻率 5 ～ 60 Hz、振幅 3 mm 的垂直振動 12 w) 大鼠腰椎小關節(jié)軟骨,，采用 HE 染色和 AB-PAS 染色,，進行 Mankin 評分評價軟骨退變程度; 免疫組化染色觀察凋亡軟骨細胞、COX-2,、PGE2,、CII 在小關節(jié)突軟骨表達; 雙能 X 線吸收法測量振動前后股骨頸骨密度。結果 對照組,、5 Hz 振動組,、20 Hz 振動組,、60 Hz 振動組小關節(jié) Mankin 評分依次增加，有顯著性差異( P ＜ 0. 05) ; 組間凋亡軟骨細胞,、COX-2,、PGE2 表達隨著振動頻率增加而顯著性增強( P ＜ 0. 05) ; 對照組與 5Hz 振動組 CII 表達差異不明顯( P ＞ 0. 05) ,，其余各組間 CII 表達差異明顯( P ＜ 0. 05) ; 組間骨密度增加值無顯著性差異,。結論 長時間垂直振動可導致軟骨退變，振動頻率越大,，小關節(jié)退變越重; 振動與致痛因子表達具有相關性; 5 ～ 60 Hz,、3 mm 振幅振動不能促進幼齡大鼠 BMD 增加。
關鍵詞: 振動; 腰椎小關節(jié); 免疫組化; 原位末端標記法腰痛是患者就診zui常見的癥狀之一,，直升機駕駛員,、汽車駕駛員等人群中發(fā)病率較高。腰痛zui常見的致病因素包括退行性骨關節(jié)炎( osteoarthritis,，OA) ,、椎間盤源性腰痛等［1］。其中 OA 的主要病理變化是關節(jié)軟骨退變,，其致病因素較多,，常見的有炎癥介質、異常機械應力等,。有研究［2］發(fā)現異常應力可影響腰椎小關節(jié)正常的軟骨組成,，從而導致關節(jié)軟骨退變，且退變程度與應力施加時間呈正相關,。在少有的研究中,，垂直振動作為應力的一種特殊形式，其對腰椎小關節(jié)退變及骨密度影響被列入本研究,。
1 材料和方法
1. 1 實驗動物6w 齡 Sprague-Dawley 雄性大鼠 40 只,，SPF 級，體重( 210 ± 10) g( jie放軍軍事醫(yī)學學院動物中心提供) ,，合格 證 號 為 SCXK-( 軍) 2012-0004,。實 驗 經309 醫(yī)院動物實驗倫理委員會許可后實施。
1. 2 腰椎小關節(jié)退變動物模
1. 2. 1 動物分組: 隨機抽簽分組: 對照組 10 只,，編號為 A; 振動實驗組 30 只,，分為 3 組，每組 10 只,，編號為 B,、C、D,，各組放入相同環(huán)境中單籠飼養(yǎng),。
1. 2. 2 建立模型: ①A 組不做特殊處理,。②將振動各組大鼠分批放入振動訓練臺的特制容器內，大鼠呈直立位,，分別對 B 組,、C 組、D 組施加 5,、20,、60 Hz垂直振動，每組振動 15 min / d,，振幅峰值為 3 mm,，連續(xù) 12 w。在振動前后,，用 5% 水合氯醛( 7 mL / kg) 經腹腔麻醉大鼠,，雙能 X 線吸收法測量股骨頸 BMD。
1. 2. 3 取材和處理: 耳緣靜脈空氣栓塞法處死各組大鼠,，收集 L5-L6 腰椎小關節(jié)軟骨; 4% 多聚甲醛溶液固定 24 h,。15% 乙二胺四乙酸脫鈣 7d。流水沖洗 24 h,。梯度酒精脫水后二甲苯透明,，石蠟包埋。六張為一組連續(xù)切片,，層厚 4 ～ 5 μm,，樹膠封固。試劑來源: 細胞凋亡檢測試劑盒由上海羅氏制藥公司提供; 兔抗大鼠環(huán)氧化酶 2 抗體,、兔抗大鼠 CollagenII 抗體,、DAB 顯色試劑盒、SABC 免疫組化試劑盒,、AB-PAS 染液由武漢博士德生物工程有限公司提供,，兔抗大鼠前列腺素 E2 抗體由上海恒遠生物科技公司提供，余試劑由jie放軍 309 醫(yī)院動物實驗室提供,。
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