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BIM酶聯(lián)免疫試劑盒,大鼠纖維蛋白肽A(FPA)試劑盒說明書
閱讀:312 發(fā)布時間:2016-9-30BIM酶聯(lián)免疫試劑盒,大鼠纖維蛋白肽A(FPA)試劑盒說明書
l 本試劑盒用于體外定量檢測血清、血漿,、組織、細胞上清及相關液體樣本中大鼠纖維蛋白肽A(FPA)的含量,。
l 有效期:6個月
l 保存條件:2-8℃
l 本試劑盒僅供體外研究使用,,不用于臨床診斷
實驗原理
試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)。往預先包被大鼠纖維蛋白肽A(FPA)捕獲抗體的包被微孔中,,依次加入標本,、標準品,、HRP標記的檢測抗體,經過溫育并*洗滌,。用底物TMB顯色,,TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成zui終的黃色,。顏色的深淺和樣品中的大鼠纖維蛋白肽A(FPA)呈正相關,。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),計算樣品濃度,。
樣本處理及要求
1. 血清:全血標本請于室溫放置2小時或4℃過一夜后于1000g離心20分鐘,,取上清即可檢測,或將標本放于-20℃或-80℃保存,,但應避免反復凍融,。
2. 血漿:可用EDTA或肝素作為抗凝劑,標本采集后30分鐘內于2 - 8°C 1000g離心20分鐘,,或將標本放于-20℃或-80℃保存,,但應避免反復凍融。
3. 組織勻漿:用預冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織,,去除殘留血液(勻漿中裂解的紅細胞會影響測量結果),,稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對應體積的PBS(一般按1:9的重量體積比,,比如1g的組織樣品對應9mL的PBS,具體體積可根據(jù)實驗需要適當調整,,并做好記錄,。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑)加入玻璃勻漿器中,于冰上充分研磨,。為了進一步裂解組織細胞,,可以對勻漿液進行超聲破碎,或反復凍融,。zui后將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘,,取上清檢測。
4. 細胞培養(yǎng)物上清或其它生物標本:1000g離心20分鐘,,取上清即可檢測,,或將標本放于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融,。
注:標本溶血會影響zui后檢測結果,,因此溶血標本不宜進行此項檢測。