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BIM酶聯(lián)免疫試劑盒,大鼠纖維蛋白肽A(FPA)試劑盒說明書

閱讀:316          發(fā)布時間:2016-9-30
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BIM酶聯(lián)免疫試劑盒,大鼠纖維蛋白肽A(FPA)試劑盒說明書

本試劑盒用于體外定量檢測血清,、血漿、組織,、細(xì)胞上清及相關(guān)液體樣本中大鼠纖維蛋白肽AFPA)的含量,。

有效期:6個月

保存條件:2-8℃

本試劑盒僅供體外研究使用,不用于臨床診斷

 

實(shí)驗(yàn)原理

試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA),。往預(yù)先包被大鼠纖維蛋白肽A(FPA)捕獲抗體的包被微孔中,,依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品,、HRP標(biāo)記的檢測抗體,,經(jīng)過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色,,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的大鼠纖維蛋白肽A(FPA)呈正相關(guān),。用酶標(biāo)儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),,計(jì)算樣品濃度,。

 

樣本處理及要求

1.  血清:全血標(biāo)本請于室溫放置2小時或4℃過一夜后于1000g離心20分鐘,取上清即可檢測,,或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存,,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2.  血漿:可用EDTA或肝素作為抗凝劑,,標(biāo)本采集后30分鐘內(nèi)于2 - 8°C 1000g離心20分鐘,,或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融,。

3.  組織勻漿:用預(yù)冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織,,去除殘留血液(勻漿中裂解的紅細(xì)胞會影響測量結(jié)果),稱重后將組織剪碎,。將剪碎的組織與對應(yīng)體積的PBS(一般按1:9的重量體積比,,比如1g的組織樣品對應(yīng)9mL的PBS,具體體積可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要適當(dāng)調(diào)整,,并做好記錄,。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑)加入玻璃勻漿器中,于冰上充分研磨,。為了進(jìn)一步裂解組織細(xì)胞,,可以對勻漿液進(jìn)行超聲破碎,或反復(fù)凍融,。zui后將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘,,取上清檢測。

4.  細(xì)胞培養(yǎng)物上清或其它生物標(biāo)本:1000g離心20分鐘,,取上清即可檢測,,或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融,。
注:標(biāo)本溶血會影響zui后檢測結(jié)果,,因此溶血標(biāo)本不宜進(jìn)行此項(xiàng)檢測。

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