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免疫膠體金固定劑的選擇與使用方法
閱讀：150 發(fā)布時(shí)間：2015-7-21| 提 供 商 | 上海恒遠(yuǎn)生物科技有限公司 | 資料大小 | 28.5KB |
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免疫膠體金銀染色和其它免疫細(xì)胞化學(xué)方法一樣,，要想得到好的染色效果，關(guān)鍵取決于標(biāo)本處理是否適當(dāng)，只有使抗原性及組織結(jié)構(gòu)保存的好,，才能使后續(xù)的染色成功成為可能，其次要用高特異性和價(jià)的一抗,，選擇合適的稀釋度,。由于免疫組化方法廣泛應(yīng)用于不同的生物學(xué)科，所要檢出的抗原種類繁多,，性質(zhì)也各不相同,。因此，不可能有一種適用于所有抗原的固定劑,，而是根據(jù)不同的抗原性質(zhì)區(qū)別對(duì)待,。根據(jù)我們使用的固定劑介紹如下，僅供參考,。
固定劑的選擇及其相應(yīng)的固定時(shí)間
（1）酶：冰凍切片不固定,，或用95%乙醇，固定時(shí)間為10min,。
（2）激素：冰凍切片,、涂片、印片,，不固定或bing酮,、甲醇、乙醇,、PEG固定,。固定時(shí)間為4℃*30min。
（3）免疫球蛋白：中性福爾馬林,、四lv化碳（1%甲醛）,，固定時(shí)間為30min。
（4）白蛋白：95%乙醇含1～5%冰醋酸。固定時(shí)間為30min,。
（5）纖維蛋白原：95%乙醇含1%～5%冰醋酸,。固定時(shí)間為30min。
（6）病毒：bing酮,、100%乙醇,、甲醇、yi醚,。固定時(shí)間為30min,。
（7）糖蛋白：PLP、bing酮,。固定時(shí)間為30min,。
（8）脂質(zhì)： Forssman 中性福爾馬林。固定時(shí)間為20min,。
（9）抗原： 2.5%硫代硫酸鈉,，冰凍切片不固定。固定時(shí)間為20min,。
（10）免疫電鏡：PLP,、戊二醛、戊二醛-多聚甲醛,、ECD-G等,。固定時(shí)間為30min。
切片的處理與粘附
免疫組化染色過程較復(fù)雜,，洗滌的次數(shù)較多,，而且均需振蕩洗滌，抗原片粘貼不牢,，往往在zui后的時(shí)刻,，還沒有等顯色就會(huì)脫落導(dǎo)致前功盡棄，這個(gè)環(huán)節(jié)雖小卻會(huì)影響大局,。因此,，為了保證切片染色成功，必須把切片處理好,，解除脫片的后顧之憂,。