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lipo2000轉(zhuǎn)染試劑使用問題解答
閱讀:480 發(fā)布時間:2015-6-17提 供 商 | 上海恒遠生物科技有限公司 | 資料大小 | 14KB |
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資料類型 | WORD 文檔 | 瀏覽次數(shù) | 480次 |
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lipo2000是各大實驗室,科學院,,技術(shù)實驗室zui常用的轉(zhuǎn)染試劑,小小的試劑,,價格不菲,,經(jīng)常聽到客戶說嚴格按照說明書來操作,還會出現(xiàn)這樣或者那樣的問題,??蛻艚?jīng)常抱怨東西貴,還做不出好效果,。
1. Lipo2000的保存:4℃保存和運輸
2. Lipo2000的活性:由于Lipo2000是生物蛋白,,在4℃保存和運輸,所以就算是同
一個批號的Lipo2000,,只有在剛出廠分裝時活性才是相同的,。經(jīng)過供應商的保存,、
運輸(運輸?shù)臏囟瓤刂聘鞑幌嗤浠钚詫⒂屑毼⒌淖兓?/span>
3. Lipo2000的優(yōu)化:
3.1 由于每一管Lipo2000的活性都不太相同,,其實就算是同一管,,使用的時間長了,后期的活性跟剛開始用時也不太一樣,,所以在拿到一管新的Lipo2000時,,一定要做一下活性優(yōu)化;
3.3 如果一直使用Lipo2000做實驗,,優(yōu)化的步驟可以簡化:
假設之前轉(zhuǎn)化時每孔一直用4ul Lipo2000,,那么優(yōu)化的步驟可以簡化為只用5個孔,每個孔中Lipo2000用量分別為3ul, 3.5ul, 4ul, 4.5ul, 5ul,,其他條件不變,,看那個Lipo2000的用量結(jié)果,接下來的實驗就用優(yōu)化的用量,。
4. Lipo2000的使用:
4.1 使用前將整管的Lipo2000混勻,,分裝,分成100ul/管,;
4.2 實驗前,,將分裝好的100ul Lipo2000和質(zhì)粒DNA(或RNA)放到實驗臺上室溫平衡,不需要冰上保存,;
4.3 將Opti-MEM培養(yǎng)基放到水浴鍋中37℃平衡,;
4.4 按照說明書進行轉(zhuǎn)染,注意控制好每一步操作的時間,。
5. 切記并不是Lipo2000的用量越多越好,,實際上,Lipo2000加多了,,毒性會增加,,細胞會死亡,轉(zhuǎn)化效率會大幅降低,。