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● 實驗前,，需自備的材料有：  
   1.蒸餾水,。
   2.加樣器：5ul、10ul,、50ul,、100ul、200ul,、500ul,、1000ul。
   3.振蕩器及磁力攪拌器等,。
● 注意安全：
   1.避免直接接觸終止液和底物A,、B，一旦接觸到這些液體,，請盡快用水沖洗,。
   2.實難中不要吃喝、抽煙或使用化妝品,。
   3.不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份,。
● 試劑的準備：
   1.標準品：標準品的系列稀釋應在實驗時準備，不能儲存,。稀釋前將標準品振蕩混勻,。 
   2.洗滌緩沖液(50×)的稀釋：蒸餾水50倍稀釋。
● 試劑盒性能：
   1.靈敏度：zui小的檢測濃度小于1號標準品,。稀釋度的線性,。樣品線性回歸與預期濃度相關系數(shù)R值為0.990。
   2.特異性：不與其它細胞因子反應,。
   3.重復性：板內,、板間變異系數(shù)均小于10%。
● 操作示意圖：
   
● 結果判斷與分析：
   1.儀器值：于波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值
   2.以吸光度OD值為縱坐標(Y),，相應的TNF-Α標準品濃度為橫坐標(X),，做得相應的曲線，樣品的TNF-A含量可根據(jù)其OD值由標準曲線換算出相應的濃度,，再乘以稀釋倍數(shù),；或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的回歸方程式,，將樣品的OD值代入方程式，計算出樣品濃度,，再乘以稀釋倍數(shù),，即為樣品的實際濃度。
   3.檢測值范圍：0-600pg/ml
   4.敏感度：1.0pg/ml