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● 實驗前,，需自備的材料有：  
   1.蒸餾水。
   2.加樣器：5ul,、10ul,、50ul、100ul,、200ul,、500ul、1000ul,。
   3.振蕩器及磁力攪拌器等,。
● 注意安全：
   1.避免直接接觸終止液和底物A、B,，一旦接觸到這些液體,，請盡快用水沖洗。
   2.實難中不要吃喝,、抽煙或使用化妝品,。
   3.不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。
● 試劑的準(zhǔn)備：
   1.標(biāo)準(zhǔn)品：標(biāo)準(zhǔn)品的系列稀釋應(yīng)在實驗時準(zhǔn)備,，不能儲存,。稀釋前將標(biāo)準(zhǔn)品振蕩混勻。 
   2.洗滌緩沖液(50×)的稀釋：蒸餾水50倍稀釋,。
● 試劑盒性能：
   1.靈敏度：zui小的檢測濃度小于1號標(biāo)準(zhǔn)品,。稀釋度的線性,。樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。
   2.特異性：不與其它細(xì)胞因子反應(yīng),。
   3.重復(fù)性：板內(nèi),、板間變異系數(shù)均小于10%。
● 操作示意圖：
   
● 結(jié)果判斷與分析：
   1.儀器值：于波長450nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔的OD值
   2.以吸光度OD值為縱坐標(biāo)(Y),，相應(yīng)的TNF-Α標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)(X),，做得相應(yīng)的曲線，樣品的TNF-A含量可根據(jù)其OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線換算出相應(yīng)的濃度,，再乘以稀釋倍數(shù),；或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式,，計算出樣品濃度,，再乘以稀釋倍數(shù)，即為樣品的實際濃度,。
   3.檢測值范圍：0-600pg/ml
   4.敏感度：1.0pg/ml