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    血清標本可按常規(guī)方法采集,，應留意避免溶血,，紅細胞溶解時會開釋出具有過氧化物酶活性的物質(zhì)，以HRP為標記的ELISA測定中,，溶血標本可能會增加非特異性顯色,。如在冰箱中保留過久，其中的可發(fā)生聚合,，在間接法ELISA中可使本底加深,。本文將敘述板式ELISA各個操縱步驟的留意要點，珠式、管式及磁性球ELSIA,，國外試劑均與特殊儀器配合應用,，嚴格遵照劃定操縱，必能得出正確的結果,。加樣時應將所加物加在LEISA板孔的底部,，避免加在孔壁上部，并留意不可濺出,，不可產(chǎn)氣憤泡,。有此測定(如間接法ELISA)需用稀的血清，可在試管中按劃定的稀釋度稀釋后再加樣,。 
    
    ELISA的操縱因固相載體的形成不同而有所差異,，海內(nèi)醫(yī)學檢修一般均用板式點。除特殊情況外,，在醫(yī)學檢修中均以血清作為檢測標本,。加酶結合物應用液和底物用液時可用定量多道加液器，使加液過程迅速完成,。如有細菌污染,，菌體中可能含有內(nèi)源性HRP，也會產(chǎn)生假陽性反應,。每次加標本應更換吸嘴,，以發(fā)生交叉污染，也可用一次性的定量塑料管加樣,。的試劑,，良好的儀器和準確的操縱是保證ELISA試劑盒檢測結果正確可靠的必要條件。ELISA頂用的蒸餾 水或去離子水,，包括用于洗滌的，應為新鮮的和高質(zhì)量的,。有些標本可直接進行測定(如血清,、尿液)，有些則需經(jīng)預處理(如糞便和某些分泌物),。
    
    在ELISA中一般有3次加樣步聚,，即加標本，加酶結合物,，加底物,。凍結血清融解后，蛋白質(zhì)局部濃縮,，分布不均,，應充分混勻宜輕緩，避免氣泡,，可上下倒置混和,，不要在混勻器上強烈振蕩,。制備血漿標本需借助于抗凝劑，而血清標本只要待血清天然凝固,、血塊收縮后即可取得,。也可在板孔中加入稀釋液，再在其加入血清標本,，然后在微型震蕩器上震蕩1分鐘以保證混和,。一般說來，在5天內(nèi)測定的血清標本可放置于4℃,，超過一周測定的需低溫冰存,。可用作ELISA測定的標本十分廣泛,，體液(如血清 ),、分泌物(唾液)和排泄物(如尿液、糞便)等均可作標本以測定其中某種抗體 或抗原成份,，ELISA試劑盒中本次試驗不需用的部分應及時放回冰箱保留,。