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恒遠分享:人α干擾素elisa試劑盒的使用*須知
閱讀:175 發(fā)布時間:2014-3-25恒遠分享:人α干擾素elisa試劑盒的使用*須知
實驗原理
本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標本中人α干擾素(IFN-α)水平,。用純化的人α干擾素(IFN-α)抗體包被微孔板,制成固相抗體,,往包被單抗的微孔中依次加入α干擾素(IFN-α),,再與HRP標記的α干擾素(IFN-α)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,,經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色,。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色,。顏色的深淺和樣品中的α干擾素(IFN-α)呈正相關(guān),。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中人α干擾素(IFN-α)濃度,。
計算
以標準物的濃度為橫坐標,,OD值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,,根據(jù)樣品的OD值由標準曲線查出相應(yīng)的濃度,;再乘以稀釋倍數(shù);或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式,,將樣品的OD值代入方程式,,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),,即為樣品的實際濃度,。
注意事項
1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,,板條應(yīng)裝入密封袋中保存,。
2.濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,,洗滌時不影響結(jié)果,。
3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其準確性,,以避免試驗誤差,。一次加樣時間控制在5分鐘內(nèi),如標本數(shù)量多,,推薦使用排槍加樣,。
請每次測定的同時做標準曲線,做復孔,。如標本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標準品孔*孔的OD值),,請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,,計算時請zui后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。
封板膜只限一次性使用,,以避免交叉污染,。
6.底物請避光保存。
7.嚴格按照說明書的操作進行,,試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.
8.所有樣品,,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
9.本試劑不同批號組分不得混用,。
10. 如與英文說明書有異,,以英文說明書為準。