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常見(jiàn)檢查方法為ELISA法檢測(cè)肺炎衣原體抗體
閱讀：216 發(fā)布時(shí)間：2013-7-10| 提 供 商 | 上海恒遠(yuǎn)生物科技有限公司 | 資料大小 | 55.8KB |
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肺炎衣原體感染廣泛存在于*，以隱性感染為主,。其臨床表現(xiàn)多樣,，主要引起人非典型肺炎，還可引起咽炎,、支氣管炎,、虹膜炎、肝炎,、心內(nèi)膜炎及結(jié)節(jié)性紅斑等,，亦是艾滋病、白血病等疾病繼發(fā)感染的重要病原,，且與冠心病的發(fā)生相關(guān),，嚴(yán)重威脅人類健康。常見(jiàn)檢查方法為ELISA法檢測(cè)肺炎衣原體抗體,。
[檢測(cè)方法] ELISA法
[方法學(xué)原理]
采用ELISA法，血清加到包被純化的肺炎衣原體抗原的微滴孔中,，使之發(fā)生反應(yīng),，然后去除未結(jié)合的抗體，加入結(jié)合有HRP的抗人Ig抗體使之與已結(jié)合的抗體反應(yīng),，結(jié)合的HRP與發(fā)色底物發(fā)生顏色反應(yīng),。zui后，終止底物反應(yīng),，在酶標(biāo)儀上讀出光密度值。
[標(biāo)本準(zhǔn)備]
取新鮮末梢血或靜脈血,。如采血后24h內(nèi)不能進(jìn)行試驗(yàn),，分離血清后將其保存于一20℃環(huán)境中。檢測(cè)時(shí),，使樣本恢復(fù)至室溫。
[檢測(cè)步驟]
1．配制洗滌液 l瓶濃縮洗滌液加475ml蒸餾水,。配好的洗滌液短期內(nèi)可置室溫環(huán)境中,，長(zhǎng)期可存于2—8℃環(huán)境中。
2．配制酶聯(lián)物 按1：101倍稀釋,，即取1u1濃縮酶聯(lián)物加酶聯(lián)物稀釋液1 000ul（根據(jù)檢測(cè)標(biāo)本數(shù)量確定稀釋量）,，未用完的丟棄。
3．待試劑盒平衡至室溫后,，待測(cè)標(biāo)本按1；51稀釋,，即取4tA血清與200u1標(biāo)本稀釋液混合,。
4．將稀釋標(biāo)本置37℃環(huán)境中20min,。
5。各加100ul陽(yáng)性,、弱陽(yáng)性,、陰性對(duì)照及已稀釋待測(cè)標(biāo)本上清液于相應(yīng)孔中,，空白對(duì)照孔加100u1標(biāo)本稀釋液，蓋好反應(yīng)板,，置37℃環(huán)境中30min,。
6,。甩盡板中液體，每孔用200～300ul洗滌液洗5次,，每次均需拍干。
7．每孔加酶聯(lián)物100~1,，蓋好反應(yīng)板,，置37℃環(huán)境中30min,。
8．甩盡板中液體,，洗5次，每次拍干,。
9．加底物A,、B各1滴或各50tzl,，混勻，置37℃環(huán)境中15min,。
10．取出，加終止液1滴,，用酶標(biāo)儀450nm測(cè)其OD值,。若肉眼觀察則不加終止液，直接判斷結(jié)果,。
[正常參考值] 肺炎衣原體抗體陰性
[注意事項(xiàng)]
1．本實(shí)驗(yàn)結(jié)果須結(jié)合臨床表現(xiàn),、病史作出診斷后,，方可采取適當(dāng)臨床處理。
2。試劑盒雖然含有消除干擾因子的物質(zhì),，但仍可能有少量標(biāo)本難以除盡干擾。因此,，如某標(biāo)本多項(xiàng)IgM均為陽(yáng)性，應(yīng)考慮RF的干擾。
[臨床意義] 肺炎衣原體,、鸚鵡熱衣原體主要引起呼吸系統(tǒng)感染,。肺炎衣原體抗體的檢測(cè)主要用于肺炎衣原體肺炎的輔助診斷和肺炎衣原體感染的流行病學(xué)調(diào)查,。肺炎衣原體抗體在健康成人中的陽(yáng)性率約25％～50％,，而兒童陽(yáng)性率低于成人,。