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論實驗室環(huán)境要求達標的重要性
閱讀：2144 發(fā)布時間：2015-3-25實驗室的環(huán)境與操作結(jié)果及安全性有著不可分割的密切關(guān)系,，要求工作環(huán)境清潔,、空氣清新、干燥燥和無煙塵,，今天我們就以細胞培養(yǎng)實驗為例,，論實驗室環(huán)境要求達標的重要性。
一,、常用設(shè)備
1.超凈工作臺：也稱凈化工作臺,，分為側(cè)流式，直流式和外流式三大類,。
2.無菌操作間：一般由更衣間,，緩沖間和操作間三部分組成。操作間放置凈化工作臺及二氧化碳培養(yǎng)箱,，離心機,，倒置顯微鏡等。緩沖間可放置電冰箱,，冷藏器及消毒好的無菌物品等,。
3.操作間：普通培養(yǎng)箱，離心機,，水浴鍋,，定時鐘,，普通天平及日常分析處理物。
4.洗刷消毒間：烤箱,，消毒鍋,，蒸餾水處理器及酸缸等。
5.分析間：顯微鏡,，計算機及打印機等,。
二、合適的氣體環(huán)境
氣體是哺乳動物細胞培養(yǎng)生存必需條件之一,，所需氣體主要有氧氣和二氧化碳。氧氣參與三羧酸循環(huán),，產(chǎn)生供給細胞生長增殖的能量和合成細胞生長所需用的各種成分,。開放培養(yǎng)時一般把細胞置于95%空氣加5%二氧化碳混合氣體環(huán)境中。
二氧化碳既是細胞代謝產(chǎn)物,，也是細胞生長繁殖所需成分,，它在細胞培養(yǎng)中的主要作用在于維持培養(yǎng)基的pH值。大多數(shù)細胞的適宜pH為7.2-7.4,，偏離這一范圍對細胞培養(yǎng)將產(chǎn)生有害的影響,。但細胞耐酸性比耐堿性大一些，在偏酸環(huán)境中更利于細胞生長,。但有一些細胞也喜歡偏堿環(huán)境中生長,，如成纖維細胞pH是7.4-7.6.每種細胞都有其zui適pH值。
三,、細胞培養(yǎng)溫度
維持培養(yǎng)細胞旺盛生長,，必須有恒定而適宜的溫度。不同種類的細胞對培養(yǎng)溫度要求也不同,，人體細胞培養(yǎng)的標準溫度為36.5℃±0.5℃,，偏離這一溫度范圍，細胞的正常代謝會受到影響,，甚至死亡,。培養(yǎng)細胞對低溫的耐受力較對高溫強，溫度上升不超過39℃時,，細胞代謝與溫度成正比,；人體細胞在39-40℃1小時，即能受到一定損傷,，但仍有可能恢復(fù),；在40-41℃1小時，細胞會普遍受到損傷,，僅小半數(shù)有可能恢復(fù),；41-42℃1小時,，細胞受到嚴重損傷，大部分細胞死亡,，個別細胞仍有恢復(fù)可能,；當(dāng)溫度在43℃以上1小時，細胞全部死亡,。相反,，溫度不低于0℃時，對細胞代謝雖有影響,，但并無傷害作用,；把細胞放入25-35℃時，細胞仍能生存和生長,，但速度減慢,；放在4℃數(shù)小時后，再回到37℃培養(yǎng),，細胞仍能繼續(xù)生長,。細胞代謝隨溫度降低而減慢。當(dāng)溫度降至冰點以下時,，細胞可因胞質(zhì)結(jié)冰受損而死亡,。但是，如果向培養(yǎng)液中加入一定量的冷凍保護劑(二甲亞砜或甘油),，可在深低溫下如-80℃或-196℃(液氮)長期保存,。