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白介素試劑盒的三項(xiàng)必知作用
閱讀:1131 發(fā)布時間:2014-7-7 進(jìn)去七月的*個小周末過去了,迎接著這新的一個工作日的同時,,上海恒遠(yuǎn)也有新資訊要分享給大家,,今天的內(nèi)容就是白介素試劑盒的三項(xiàng)必知作用。
1. 酶和底物:在ELISA中zui常用的酶為HRP和ALP,。
2. 抗原
在ELISA中應(yīng)用的抗原要求有較高的特異性,、親和力和純度。主要有3類,,即自然抗原,、人工合成抗原和基因重組抗原。自然抗原的純度不高,,特異性不強(qiáng),;合成抗原一般為多肽片段,缺乏天然抗原所具有的立體結(jié)構(gòu)表位,,親和力不高,,可能導(dǎo)致相應(yīng)表位的抗體漏檢;基因重組抗原具有安全,、特異性強(qiáng),、親和力高、產(chǎn)量大等特點(diǎn),,是一種比較理想的抗原,,但其純化比較困難。
3. 抗體
在ELISA中應(yīng)用的抗體可分為多克隆抗體(多抗)和單克隆抗體(單抗),。多抗取白免疫動物的抗血清,,制備較簡單,但抗血清成分復(fù)雜,,除含針對抗原(多個表位)的抗體外,,還含有多種其他抗體,親和力和特異性相對要低于單抗,,且制備周期長,,批間差異較大。而單抗僅針對抗體的單一表位,,親和力和特異性均較多抗高,,且制備技術(shù)成熟,產(chǎn)量大,批間差異小,,但結(jié)合位點(diǎn)的單一也正是其弱點(diǎn)之所在,,在雙抗體夾心法中,如包被和指示抗體使用同一單抗,,則由于結(jié)合位點(diǎn)的缺乏,,容易造成假陰.性結(jié)果。在使用雙單抗一步法時,,應(yīng)注意抗原過剩時的“鉤狀效應(yīng)”,。
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