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    噬菌體在微生物界同樣存在類似動植物界的食物鏈一樣的關(guān)系,，噬菌體滴度是如何測定的呢,？再次與朋友見面就已經(jīng)是2014年了,，我公司的跨年*也已經(jīng)圓滿的結(jié)束了,，而現(xiàn)在才是新年的開始，購我公司產(chǎn)品立送精美臺歷一個哦,！下面來看看今天上海恒遠(yuǎn)為您特別分享：測定噬菌體滴度的方法,。

    在宿主細(xì)胞過量的情況下，噬斑的數(shù)量隨著噬菌體的增加呈線性增加,。由于這個原因,，在感染以前，要將噬菌體進(jìn)行稀釋,，而不是將宿主細(xì)胞稀釋。以低MOI(感染重復(fù)性)鋪板,，也可確保每一個噬斑僅包含一個DNA,。 

材料和試劑：
1、微波爐,；
2,、LB/IPTG/Xgal培養(yǎng) 板；
3,、lb培養(yǎng)基,；
4、頂層瓊脂糖凝膠,。

操作步驟：
1,、在5~10ml LB培養(yǎng)基中接種單個ER2537克隆，振搖孵育直至對數(shù)生長中期(OD600~0.5),。
2,、在細(xì)胞生長時，微波融化頂層瓊脂糖凝膠,，分裝至無菌培養(yǎng)管內(nèi),，每管3ml。維持在45℃?zhèn)溆谩?br>3,、37℃預(yù)熱LB/IPTG/Xgal培養(yǎng)板,，備用,。
4、以LB培養(yǎng)基10倍比稀釋噬菌體,。
建議稀釋范圍：對擴(kuò)增的噬菌體培養(yǎng)上清,，108-1011;對未擴(kuò)增的篩選洗脫液，101-104,。每次稀釋都換用新的加樣槍頭,，使用氣溶膠阻隔槍頭以避免交叉污染。
5,、一旦ER2537培養(yǎng)物長至對數(shù)生長中期,，分裝至微量離心管中，每管200ml,。
6,、將倍比稀釋的噬菌體上清加入含細(xì)菌培養(yǎng)物的微量離心管中，一支微量離心管中僅加入一種稀釋液10ml,，快速渦旋,，室溫孵育1-5min。
7,、轉(zhuǎn)移至含有45℃頂層瓊脂糖凝膠的管中,，快速渦旋混勻，立即傾倒至預(yù)熱的LB/IPTG/Xgal平板上,，輕緩搖動平板使頂層膠均勻分布,。
8、冷卻平板5min,，37℃倒置培養(yǎng)過一個夜,。
9、噬斑計數(shù)以噬斑數(shù)為100左右的平皿為準(zhǔn),，噬斑數(shù)乘以稀釋度即可獲得每10ml噬菌體的滴度-噬斑形成單位(pfu),。

    朋友們，以上就是測定噬菌體滴度的方法啦,，測定試驗過后記得把結(jié)果與心得記錄下來哦,！這里是上海恒遠(yuǎn)ELISA試劑盒供應(yīng)商，感謝朋友們對我公司的支持,！