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elisa加樣實(shí)驗(yàn)常見問題解答
閱讀:1573 發(fā)布時間:2013-3-12ELISA試驗(yàn)以靈敏度較高,、特異性較好的特點(diǎn)在臨床上得到了廣泛的應(yīng)用,,但操作中的各個環(huán)節(jié)對試驗(yàn)的檢測效果影響較大,,如不注意,,有可能導(dǎo)致顯色不全,、花板等結(jié)果。
影響ELISA試驗(yàn)效果常見問題原因分析及解決辦法
選擇試劑時,,應(yīng)選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑,,嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘,。
加樣可能碰到的問題:
1,、過長(特別是室內(nèi)溫度較高時);
2,、手工操作中,,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間;
3,、加完標(biāo)本再加酶試劑時酶濺出孔外,。.血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣。
相應(yīng)解決辦法:
1,、標(biāo)本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,,再用3000rmp離心15分鐘,;標(biāo)本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管,采血后必須立即顛倒采血管混合5-10次,,放置一段時間后,,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測,,可放在2-8℃冰箱中,,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi),。
2,、加樣后及時放入孵箱。
3,、加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干,。
4、如果采用AT或其他全自動加樣,,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑,。
5,、標(biāo)本較多時,,請分批操作。
elisa試劑盒在實(shí)際操作中,,除了選擇優(yōu)良試劑外,,必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作,同時作好室內(nèi)質(zhì)控,、室間質(zhì)評,,以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測每一份標(biāo)本,才能保證檢測質(zhì)量?,F(xiàn)在國內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動酶標(biāo)儀,,這對于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用,。