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幽門螺旋桿菌抗原快速檢測(cè)條使用說明書
閱讀：2369 發(fā)布時(shí)間：2012-3-23
幽門螺旋桿菌抗原快速檢測(cè)條使用說明書
一步檢測(cè)幽門螺旋桿菌
使用說明
CerTest的幽門螺旋桿菌抗原快速檢測(cè)條利用免疫層析法一步定性檢測(cè)大便樣本中的幽門螺旋桿菌,。
簡(jiǎn)介
幽門螺旋桿菌（.H.P）是發(fā)現(xiàn)于胃粘液層或依附于胃上皮層的一個(gè)螺旋形的典型鞭毛,，革蘭氏陰性細(xì)菌,，感染胃粘膜,。它引發(fā)了超過90%的十二指腸潰瘍和將近80%的胃潰瘍,。
隨著該細(xì)菌存在與腸胃（胃和十二指腸）疾?。ㄈ缥秆住⑽笣兒臀赴┐_診之間強(qiáng)相關(guān)性的確定,，HP抗原檢測(cè)的重要性日益彰顯,。
測(cè)試原理
.H.P抗原快速檢測(cè)條應(yīng)用免疫層析法定性檢測(cè)大便樣本中的幽門螺旋桿菌。檢測(cè)帶區(qū)域的反應(yīng)膜預(yù)包被多克隆抗體,，以結(jié)合.H.P抗原,。
在檢測(cè)過程中，樣本可以與事先預(yù)染在檢測(cè)條中的有色結(jié)合物（抗H.P多克隆抗體-紅色聚苯乙烯微球）反應(yīng)得到結(jié)合物,。然后結(jié)合物通過毛細(xì)管作用在膜上繼續(xù)向前移動(dòng),。當(dāng)樣本流經(jīng)檢測(cè)膜時(shí)，有色微粒移動(dòng),。當(dāng)存在陽(yáng)性結(jié)果的時(shí)候,，膜上的特異性抗體將捕獲有色結(jié)合物。該結(jié)合物繼續(xù)向前移動(dòng)至質(zhì)控帶固定的抗體位置,，一條綠色的條帶,。綠色條帶的出現(xiàn)有兩個(gè)意義：1）確認(rèn)加入了足夠量的樣本,；2）確認(rèn)流向正確；3）作為試劑的內(nèi)部質(zhì)控,。
儲(chǔ)存和穩(wěn)定性
于2-30ºC下密封保存,，檢測(cè)條可穩(wěn)定至每個(gè)包裝上的的保質(zhì)期。檢測(cè)條直到使用時(shí)才拆開密封包裝,。請(qǐng)勿冰凍,。
注意事項(xiàng)
1. 僅供專業(yè)人士體外診斷
2. 請(qǐng)勿使用過期產(chǎn)品
3. 所有的樣本需考慮到潛在的有害性并按照污染物處理方式處理
4. 檢測(cè)后應(yīng)將廢棄的檢測(cè)卡丟棄在適當(dāng)?shù)纳镂：θ萜髦小?/div>
標(biāo)本采集和準(zhǔn)備
糞便標(biāo)本應(yīng)儲(chǔ)存在干凈容器中，取樣后立即檢測(cè),。樣品冷藏（2-4℃）可保存1-2天,，-20℃冷凍zui長(zhǎng)可儲(chǔ)存1年。如冷凍,，應(yīng)*解凍并恢復(fù)至室溫后方可進(jìn)行檢測(cè),。
樣品制備（見下圖）
（1）擰開蓋，用小棍棒挑取一點(diǎn)標(biāo)本,，如果糞便標(biāo)本是液狀,，則用吸樣槍吸取100ul，將取出的樣品放入試管內(nèi),。
（2）將糞便標(biāo)本與稀釋液混合,，搖晃試管使樣品充分分散。
提供材料
l 檢測(cè)條
l 樣本稀釋液
l 說明書
l 糞便收集管
需自備材料
l 樣品收集容器
l 檢測(cè)管或瓶
l 一次性手套
l 計(jì)時(shí)器
操作程序
檢測(cè)前先將質(zhì)控品和糞便標(biāo)本恢復(fù)至室溫（15-30℃）,。在未準(zhǔn)備好檢測(cè)前請(qǐng)勿撕開包裝,。拆開之前僅將所需要數(shù)量的檢測(cè)卡/條恢復(fù)至室溫。有以下兩種方式進(jìn)行試驗(yàn)的操作：
A）以卡的方式進(jìn)行檢測(cè)：
1. 使用前撕開檢測(cè)卡的包裝,。
2. 繼續(xù)搖晃試管是糞便*散開,。折斷試管頂端（3）。
3. 水平放置每個(gè)樣品及質(zhì)控品均單獨(dú)收集,，準(zhǔn)確滴加5滴或150ul樣品在檢測(cè)條的白色端（4）,。每個(gè)樣本或質(zhì)控品分別使用大便收集管和裝置。
4. 10分鐘之內(nèi)讀取結(jié)果,。
Ｂ）條的檢測(cè)方式
1. 使用前撕開檢測(cè)卡的包裝,。
2. 繼續(xù)搖晃試管是糞便*散開。折斷試管頂端（3）,。
3. 加10滴樣本稀釋液于檢測(cè)管或檢測(cè)瓶中（5）,。將H.P抗原檢測(cè)條白色的一端向下垂直浸入樣本中，注意不要超出沉浸線標(biāo)記,。
4. 10分鐘之內(nèi)讀取結(jié)果,。
| A）以卡的方式進(jìn)行檢測(cè) |
| B）條的檢測(cè)方式 |
| 加5滴 |
| 加10滴 |
結(jié)果判讀 （請(qǐng)參見以下插圖）
| 陽(yáng)性 陰性 無效 |
陰性：只在白色的中心區(qū)域（質(zhì)控區(qū)域）顯示一條綠色線（質(zhì)控線）的為陰性。
陽(yáng)性：質(zhì)控區(qū)域出現(xiàn)一條綠色線,，白色的中心區(qū)域（檢測(cè)區(qū)域）出現(xiàn)一條紅色線（結(jié)果線）,。
無效結(jié)果：質(zhì)控區(qū)域沒有出現(xiàn)綠色線,，檢測(cè)區(qū)域不管有無線顯示都為無效結(jié)果。不夠量的樣本,、不正確的操作程序,、或變質(zhì)的試劑zui有可能導(dǎo)致無效的結(jié)果。如果這個(gè)問題繼續(xù),，終止使用該試劑盒并您當(dāng)?shù)氐慕?jīng)銷商,。
結(jié)果解讀注意事項(xiàng)
結(jié)果線區(qū)域內(nèi)（T）的紅色帶的深淺表示樣本抗原的濃度。但是這種定性檢測(cè)不能決定抗原的定量值或增加的比率,。
質(zhì)量控制
本檢測(cè)卡中包含有內(nèi)部控制,。在質(zhì)控區(qū)域（C）顯示的綠色帶是一條內(nèi)部控制線。它可確認(rèn)標(biāo)本量的是否足夠或操作程序是否正確,。
局限性
1． 檢測(cè)必須在密封袋開封后兩小時(shí)內(nèi)完成,。
2． 糞便過量可導(dǎo)致結(jié)果錯(cuò)誤（看起來為棕褐色）。須用稀釋液稀釋樣本并重復(fù)檢測(cè),。
3． 某些稀薄的或腹瀉的樣本可能降低顯色的強(qiáng)度,。
4． 本檢測(cè)只作為幽門螺旋桿菌感染的初步診斷，臨床醫(yī)生在此基礎(chǔ)上進(jìn)行進(jìn)一步的臨床觀察和實(shí)驗(yàn)室綜合評(píng)估后做出確診,。
性能參數(shù)
靈敏度和特異性
對(duì)出現(xiàn)H.P感染癥狀的患者進(jìn)行檢測(cè),。通過與市面有售的ELISA方法的H.P檢測(cè)產(chǎn)品進(jìn)行對(duì)比，對(duì)CerTest的H.P抗原檢測(cè)條進(jìn)行評(píng)價(jià),。
靈敏度 特異性
＞94%； ＞99%,。
產(chǎn)品中使用的鼠單克隆抗體保證了該檢測(cè)的高特異性,。該抗體過去常常用于H.P檢測(cè)，能識(shí)別在患者大便樣本和體外細(xì)菌培養(yǎng)中的抗原上的抗原決定部位,，提來自不同商業(yè)樣本的降解幽門螺旋桿菌提取物能與H.P檢測(cè)條反應(yīng),。
參考文獻(xiàn)
1- Bruce E. Dunn, Hartley Cohen & Martin J. Blaser. Helicobacter pylori. Clin. Microbiol. Rev.
10 （4）, 720-741, Oct. （1997）
2- Martin J. Blaser. Helicobacter pylori and gastric diseases. BMJ; 316: 1507-1510 （1998）.
3- John L. ford, Antonello Covacci, Rino Rappuoli & Paolo Ghiara. Immunobiology of
Helicobacter pylori infections. Current Opinion in Immunology, 9; 498-503 （1997）.