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恒遠生物為大家分享胎牛血清正確的存放和解凍
閱讀:1041 發(fā)布時間:2024-4-28胎牛血清在科研市場上應用廣泛,但對于胎牛血清的使用及保存,,有一部分人可能不是很清楚,,下面恒遠生物把胎牛血清的儲存、常見問題以及處理方法分享給大家,。
一,、不使產品質量受損的儲存和解凍血清
未拆封的血清,一般情況下應存放于-10℃至-20℃,,在產品規(guī)定的效期內均可使用,,若一次無法用完一瓶,建議無菌分裝血清至合適大小的無菌離心管內,,再放回冷凍,。將血清從冷凍冰箱取出后,,先置于2~8℃冰箱使之融解,然后在室溫下使之全融,,或通過水浴鍋促使其溶解,。
注:融解過程中必須規(guī)則地搖晃均勻。溶解后建議盡快使用,,若長時間儲存在2-8℃,,血清中的各種(脂)蛋白(如冷凝集素、纖維蛋白原,、玻粘連蛋白等)可能因凝集而形成沉淀或可見的混濁,。
二、血清中的絮狀沉淀是什么應該如何處理
1.將冷凍保存的血清取出后,,置4℃冰箱靜止過夜,。
2.待血清融化后,上下顛倒,,輕輕混勻,,繼續(xù)4℃2~3小時。
3.輕輕吸取上層血清,,分裝,,余底下50ml左右。
4.低速離心5分鐘,,去掉沉淀,。
三,、如何處理解凍后出現的絮狀沉淀物
1.胎牛血清中沉淀物出現的原因有許多種,,但普遍的原因是由于胎牛血清中脂蛋白的變性造成,,而血纖維蛋白(形成凝血的蛋白之一)在胎牛血清解凍后,,也會存在于胎牛血清中,,亦是造成沉淀物的主要原因之一,。(這些絮狀沉淀物,,并不影響胎牛血清本身的質量。)
2.若想去除這些絮狀沉淀物,,可將胎牛血清分裝至無菌離心管內,,以400g稍微離心,,上清液即可接著加入培養(yǎng)基內一起過濾,。(不建議以過濾的方式去除絮狀沉淀物,會有阻塞過濾膜的可能),。
3.解凍胎牛血清時,,按照所建議的逐步解凍法(-20℃至4℃至室溫),,若胎牛血清解凍時改變的溫度太大(如-20℃至37℃),,實驗顯示非常容易產生沉淀物,。(解凍時均勻搖晃胎牛血清,,減少沉淀的發(fā)生),。
4.請勿將胎牛血清置于37℃太久,,因為會導致胎牛血清變得混濁,,同時胎牛血清中許多較不穩(wěn)定的成分也會受到損害,影響胎牛血清的質量,。胎牛血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多,,若非必要,即無須做此步驟,。若必須做胎牛血清的熱滅活,,請遵守56℃,30分鐘的原則,,并且隨時搖晃均勻,。
四,、如何避免血清中產生沉淀
1.解凍時,請隨時將之搖晃均勻,,使溫度及成分均一,。
2.分裝凍存時,須規(guī)則搖晃均勻(勿造成氣泡),。
3.切勿由-20℃直接至37℃水浴鍋解凍,,較大的溫差,易造成蛋白質凝結而發(fā)生沉淀,。
4.切勿將血清置于37℃過長時間,,否則可能使之渾濁,,其中一些不穩(wěn)定的組分也會因此受到影響,終降低血清的品質,。
5.血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,,即無須做此步驟,。
6.若必須做血清的熱滅活,,請遵守56℃,,30分鐘的原則,并且保持搖晃均勻,。溫度過高、時間過久或搖晃不均勻,,都會造成沉淀物的增多,。