日韩av大片在线观看欧美成人不卡|午夜先锋看片|中国女人18毛片水多|免费xx高潮喷水|国产大片美女av|丰满老熟妇好大bbbbbbbbbbb|人妻上司四区|japanese人妻少妇乱中文|少妇做爰喷水高潮受不了|美女人妻被颜射的视频,亚洲国产精品久久艾草一,俄罗斯6一一11萝裸体自慰,午夜三级理论在线观看无码

細(xì)胞復(fù)蘇的原則

快速融化：必須將凍存在-196℃液氮中的細(xì)胞快速融化至37℃，使細(xì)胞外凍存時的冰晶迅速融化,，避免冰晶緩慢融化時進(jìn)入細(xì)胞形成再結(jié)晶,，對細(xì)胞造成損害。

一. 實驗前準(zhǔn)備：

1.將水浴鍋預(yù)熱至37℃

2.用75％酒精擦拭紫外線照射30min的超凈工作臺臺面,。

3.在超凈工作臺中按次序擺放好消過毒的離心管,、吸管、培養(yǎng)瓶等,。

二．取出凍存管：

1.根據(jù)細(xì)胞凍存記錄按標(biāo)簽找到所需細(xì)胞的編號,。

2.從液氮罐中取出細(xì)胞盒，取出所需的細(xì)胞,，同時核對管外的編號,。

三．迅速解凍：

1.迅速將凍存管投入到已經(jīng)預(yù)熱的水浴鍋中迅速解凍，并要不斷的搖動,，使管中的液體迅速融化,。

2.約1-2min后凍存管內(nèi)液體溶解，取出用酒精棉球擦拭凍存管的外壁，再拿入超凈臺內(nèi),。

四.平衡離心：

用架盤天平平衡后,，放入離心機(jī)中3000r/min 離心3min 

五.制備細(xì)胞懸液：

1.吸棄上清液。

2.向離心管內(nèi)加入10ml培養(yǎng)液,，吹打制成細(xì)胞懸液,。

六.細(xì)胞計數(shù)：

細(xì)胞濃度以5×105/ml為準(zhǔn)。

七.培養(yǎng)細(xì)胞：

將復(fù)合細(xì)胞計數(shù)要求的細(xì)胞懸液分裝入培養(yǎng)瓶內(nèi),，將培養(yǎng)瓶放入37℃5％CO2的培養(yǎng)箱內(nèi)2-4小時（或者24-48小時）后換液繼續(xù)培養(yǎng)培養(yǎng),，換液時間由細(xì)胞情況而定。

特別注意初學(xué)者常犯的錯誤：

1水浴鍋未預(yù)熱或者未預(yù)熱到37℃,。

2.水浴鍋內(nèi)凍存管太多,，導(dǎo)致傳熱不佳，使融化時間延長,。

3.離心前忘記平衡,，導(dǎo)致離心機(jī)損壞和細(xì)胞丟失。

4.一次復(fù)蘇細(xì)胞過多,，忘記更換吸頭和吸管，導(dǎo)致細(xì)胞交叉污染,。