技術(shù)文章
ELISA加樣時(shí)為何要避免氣泡的原因以及避免方法介紹
閱讀:4206 發(fā)布時(shí)間:2021-3-1相信大家在很多說明書或教科書上都看到過這樣的一條提示,,就是加樣時(shí)要避免出現(xiàn)氣泡,,這到底是什么原因呢?因?yàn)樵谧鰧?shí)驗(yàn)的過程中,,有時(shí)為了打干凈槍頭里面的液體,,很容易產(chǎn)生氣泡,這樣對實(shí)驗(yàn)結(jié)果會(huì)產(chǎn)生什么影響呢?
1.通常氣泡都是聚集在酶標(biāo)板的孔周圍,,導(dǎo)致孔中液體不能與孔壁有效接觸,,使
2.孔內(nèi)反應(yīng)不均一,。
3.包被時(shí)有氣泡的話,將導(dǎo)致包被不*實(shí)際包被量下降--弱陽性甚至假陰性,。
4.封閉時(shí)有氣泡的話,,將導(dǎo)致大量未結(jié)合位點(diǎn)的存在,引起非特異性結(jié)合--本底增高,,假陽性,。
5.加樣時(shí)有氣泡的話,抗原抗體不能有效的結(jié)合--弱陽性甚至假陰性,。
6.加二抗時(shí)有氣泡的話,抗原抗體不能有效的結(jié)合--弱陽性甚至假陰性(競爭法相反----假陽性),。
7.加顯色液時(shí)有氣泡的話---顯色不*,。
8.加終止液時(shí)有氣泡的話(1、不能*終止反應(yīng) 2,、影響酶標(biāo)儀比色,,OD值增高)
9.洗滌時(shí)有氣泡的話,非特異性結(jié)合物不能*洗去,,做無用功,。
避免方法:
1、加樣時(shí)盡量靠近孔底(不要接觸孔底),,用力均勻,,不要過快過猛。
2,、封閉時(shí)一定要加滿孔,,
3、洗滌時(shí)一定要加滿孔(重要),,氣泡會(huì)浮上來終驅(qū)除,。手工洗板時(shí)一定要吸干水分并用力拍干。
上海恒遠(yuǎn)希望每位科研工作者都能做出令自己滿意的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,。上海恒遠(yuǎn)生物試劑盒質(zhì)量過硬,,還有全面的技術(shù)指導(dǎo),購試劑盒上海恒遠(yuǎn)是您不錯(cuò)的選擇,。