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技術(shù)快訊:SH30396.03胎牛血清使用中的常見(jiàn)問(wèn)題解答
閱讀:1183 發(fā)布時(shí)間:2021-1-15SH30396.03胎牛血清是細(xì)胞培養(yǎng)中用量大的天然培養(yǎng)基,,含有豐富的細(xì)胞生長(zhǎng)必須的營(yíng)養(yǎng)成份,,常用于動(dòng)物細(xì)胞的體外培養(yǎng),具有極為重要的功能,。今天恒遠(yuǎn)生物小編給大家講講SH30396.03胎牛血清在使用中常見(jiàn)的問(wèn)題解析,。
一,、保存血清好的辦法,?
我們建議血清應(yīng)保存在-5℃至-20℃。若你一次無(wú)法用完一瓶,,建議您無(wú)菌分裝血清至恰當(dāng)?shù)臏缇萜鲀?nèi),,再放回冷凍。
二,、如何解凍血清才不會(huì)使產(chǎn)品質(zhì)量受損,?
我們建議您將血清從冷凍箱中取出后,先置于2-8℃冰箱中使之溶解,,然后在室溫下使之全溶,。但必須注意的是,溶解過(guò)程中必須規(guī)則地?fù)u晃均勻,。
三,、血清解凍后發(fā)現(xiàn)有絮狀沉淀物出現(xiàn),,該如何處理?
血清中沉淀物的出現(xiàn)有許多原因,,但普遍的原因是由于血清中脂蛋白的變性造成的,;而血纖維蛋白(形成凝血的蛋白之一)在血清解凍后,也會(huì)存在于血清中,,亦是造成血清沉淀物的主要原因之一,。但這些絮狀沉淀物,并不影響血清本身的質(zhì)量,。
若您欲去除這些絮狀沉淀物,,可以將血清分裝至無(wú)菌離心管中,以400g稍微離心,,上清液即可接著加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過(guò)濾,。我們不建議您以過(guò)濾的方法去除這些絮狀沉淀物,因?yàn)樗赡軙?huì)阻塞您的過(guò)濾膜,。
四,、何謂熱滅活?有必要做熱滅活嗎,?
一般以56℃,,30分鐘來(lái)處理已解凍的血清,因?yàn)榇思訜岵襟E,,可以使補(bǔ)體去活性,,而補(bǔ)體所參與的反應(yīng)有:溶細(xì)胞活性,平滑肌的收縮,,肥大細(xì)胞和血小板組胺的釋放,,增強(qiáng)吞噬作用,淋巴細(xì)胞,、巨噬細(xì)胞的趨化和激活,。
實(shí)驗(yàn)顯示,經(jīng)過(guò)正確處理的熱滅活血清,,對(duì)大多數(shù)的細(xì)胞而言是不需要的,。經(jīng)過(guò)處理的血清對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)只有微小的促進(jìn),或*沒(méi)有任何作用,,甚至通常因?yàn)楦邷靥幚碛绊懥搜宓馁|(zhì)量,,而造成細(xì)胞生長(zhǎng)速率的降低。
而經(jīng)過(guò)熱處理的血清,,沉淀物的形成會(huì)顯著的增多,,這些沉淀物在倒置顯微鏡下觀察,像是“小黑點(diǎn)”,,常常會(huì)讓研究者誤以為是血清遭受污染,,而把血清放在37℃環(huán)境中,,又會(huì)使此沉淀物更增多,使研究者認(rèn)為是微生物的分裂擴(kuò)增,。
因此我們建議您,,若非必須,您可以不需要做熱滅活這一步,。如此以來(lái),,不但節(jié)省您寶貴的時(shí)間,更確保您血清的質(zhì)量,!
五,、如何避免沉淀物的出現(xiàn)?
我們建議您在使用血清的時(shí)候,,注意正確的血清解凍步驟,,并盡量避免滅活血清及長(zhǎng)時(shí)間的將血清置于高溫環(huán)境中。
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