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關(guān)于胎牛血清的常見(jiàn)問(wèn)題你知道嗎?
閱讀:1290 發(fā)布時(shí)間:2020-11-251.如何儲(chǔ)存和解凍血清才不會(huì)使產(chǎn)品質(zhì)量受損?
將血清從冷凍箱取出后,,先置于2~8℃冰箱使之融解,然后在室溫下使之全融,。但必須注意的是,,融解過(guò)程中必須規(guī)則地?fù)u晃均勻。
長(zhǎng)時(shí)間儲(chǔ)存在2-8℃時(shí),,血清中的各種蛋白和脂蛋白(如冷凝集素,、纖維蛋白原、玻粘連蛋白等)可能聚集而形成沉淀或可見(jiàn)的混濁,。因此,,推薦在-20℃以下儲(chǔ)存血清,并避免反復(fù)凍融,。
建議血清應(yīng)保存在-2O℃,。若存放于4℃時(shí),請(qǐng)勿超過(guò)一個(gè)月,。若一次無(wú)法用完一瓶,,建議無(wú)菌分裝血清至恰當(dāng)?shù)臏缇萜鲀?nèi),,再放回冷凍。
2.血清中包含絮狀沉淀是什么,,怎么處理,?
沉淀包含纖維蛋白和脂蛋白。這是正常特性,,不會(huì)影響產(chǎn)品性質(zhì),。要除去沉淀,離心血清(400g,,1-2分鐘)或者簡(jiǎn)單的讓其沉淀在瓶子底部,,將血清小心的轉(zhuǎn)移到另一個(gè)無(wú)菌瓶里(一般不建議采用過(guò)濾的方法除去沉淀,因?yàn)槌恋頃?huì)堵塞濾膜而無(wú)法過(guò)濾),。大多情況輕輕搖動(dòng)沉淀并加熱至37℃就會(huì)再溶解,。所以,使用產(chǎn)品時(shí)要搖動(dòng)并加熱血清至37℃,,沉淀會(huì)自然消失,。
3.如何避免血清中產(chǎn)生沉淀?
按如下操作可避免沉淀的產(chǎn)生:
①解凍血清時(shí),請(qǐng)隨時(shí)將之搖晃均勻,,使溫度及成分均一,,減少沉淀的發(fā)生。
②血清分裝凍存時(shí),,須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡),,使溫度與成分均一。
③勿直接由-20℃直接至37℃解凍,,因溫度改變太大,,容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沉淀。
④勿將血清置于37℃太久,,否則血清會(huì)變得渾濁,,同時(shí)血清中許多較不穩(wěn)定的成份也會(huì)因此受到破壞,,從而影響血清的品質(zhì),。
⑤血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,,可以無(wú)須做此步驟,。
⑥若必須做血清的熱滅活,請(qǐng)遵守56℃,,30分鐘的原則,,并且隨時(shí)搖晃均勻。溫度過(guò)高,,時(shí)間過(guò)久或搖晃不均勻,,都會(huì)造成沉淀物的增多,。
4.培養(yǎng)基中添加了血清和抗生素后,可長(zhǎng)期保存嗎?
一旦在新鮮培養(yǎng)基中添加了血清和抗生素時(shí),,應(yīng)該在兩到三周內(nèi)使用它,。因?yàn)橐恍┛股睾脱逯械幕境煞衷诮鈨龊缶烷_(kāi)始降解。
5.為什么要熱滅活血清?
加熱可以滅活補(bǔ)體系統(tǒng),。激活的補(bǔ)體參與溶解細(xì)胞事件,,刺激平滑肌收縮,細(xì)胞和血小板釋放組胺,,激活淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞,。在免疫學(xué) 研究,培養(yǎng)ES細(xì)胞,、平滑肌細(xì)胞時(shí),,推薦使用熱滅活血清。
6.有必要做熱滅活嗎?
實(shí)驗(yàn)顯示,,經(jīng)過(guò)正確處理的熱滅活血清,,對(duì)大多數(shù)的細(xì)胞而言是不需要的。經(jīng)此處理過(guò)的血清對(duì)細(xì)胞的生長(zhǎng)只有微小的促進(jìn),,或*沒(méi)有任何作用,,甚至通常因?yàn)楦邷靥幚碛绊懥搜宓馁|(zhì)量,而造成細(xì)胞生長(zhǎng)速率的降低,。而經(jīng)過(guò)熱處理的血清,,沉淀物的形成會(huì)顯著的增多,這些沉淀物在倒置顯微鏡下觀(guān)察,,像是“小黑點(diǎn)”,,常常會(huì)讓研究者誤以為是血清遭受污染,而把血清放在37℃環(huán)境中,,又會(huì)使此沉淀物更增多,,使研究者誤認(rèn)為是微生物 的分裂擴(kuò)增。
若非必須,,可以不需要做熱處理這一步,。不但節(jié)省時(shí)間,更確保血清的質(zhì)量!
綜上所述,,了解使用血清時(shí)的注意事項(xiàng)遠(yuǎn)遠(yuǎn)比知道胎牛血清哪家質(zhì)量好更為有用,。因?yàn)槟軌驔Q定胎牛血清終使用效果的往往是使用時(shí)的操作,如果不注重血清使用的注意事項(xiàng)肆意而為,,那么再優(yōu)質(zhì)的血清也會(huì)變得劣質(zhì),,而且造成實(shí)驗(yàn)室或者生產(chǎn)企業(yè)的重大損失,其重要性可見(jiàn)一斑,。