日韩av大片在线观看欧美成人不卡|午夜先锋看片|中国女人18毛片水多|免费xx高潮喷水|国产大片美女av|丰满老熟妇好大bbbbbbbbbbb|人妻上司四区|japanese人妻少妇乱中文|少妇做爰喷水高潮受不了|美女人妻被颜射的视频,亚洲国产精品久久艾草一,俄罗斯6一一11萝裸体自慰,午夜三级理论在线观看无码

    細(xì)胞懸液是指single cell suspension,。一般就是指把貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞消化吹打以后形成的懸液,，一般會吹打多次，使粘連的細(xì)胞都分開,。當(dāng)然,，本身是懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞的話，就不用消化了,。

    制備細(xì)胞懸液

    （1）用75%酒精棉球消毒超凈工作臺臺面,，然后用75%酒精棉球消毒雙手及暴露部位；

    （2）用75%酒精棉球消毒各培養(yǎng)用液的瓶蓋以及培養(yǎng)瓶瓶蓋部位,，并在酒精燈外焰上方一過,，擰開瓶蓋，將瓶口再在酒精燈外焰上方一過后,，擰上瓶蓋,，但不要擰緊，以便下步操作,；?

    （3）輕輕將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液倒入燒杯中,，注意不要讓瓶口碰到燒杯，不要讓液體濺出,；

    （4）吸取PE液3ml加入瓶內(nèi),，加入時注意從側(cè)面加入而不能直接沖細(xì)胞貼壁處，避免造成細(xì)胞脫壁,，然后蓋上蓋子,，平放輕搖40下，輕輕倒出,，要求倒干凈,；

    （5）加入0.3ml的0.25%胰蛋白酶液，加入時直沖細(xì)胞貼壁處,，平放輕搖,，使酶液漫過整個瓶底部，一分鐘之內(nèi)將培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡臺上進行觀察,，可發(fā)現(xiàn)細(xì)胞質(zhì)漸漸回縮,，細(xì)胞間隙增大，細(xì)胞慢慢變圓,，用手掌拍打瓶底和瓶側(cè),，使細(xì)胞從瓶壁上脫落下來并分散,，呈懸浮狀,；

    （6）立即加入5mlMEM+10%小牛血清,，用吸管向瓶壁輕輕吹吸幾次，從培養(yǎng)瓶底部一邊開始到另一邊結(jié)束,，以確保所有底部都被吹到,，使細(xì)胞全部從瓶壁脫落并形成均勻的細(xì)胞懸液；