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    流式細(xì)胞術(shù)（Flow CytoMeter, FCM）是一種在功能水平上對(duì)單細(xì)胞或其他生物粒子進(jìn)行定量分析和分選的檢測(cè)手段，它可高速分析上萬(wàn)個(gè)細(xì)胞,，并能同時(shí)從一個(gè)細(xì)胞中測(cè)得多個(gè)參數(shù)，與傳統(tǒng)熒光鏡檢查相比,，具有速度快,、精度高、準(zhǔn)確性好等優(yōu)點(diǎn),，成為當(dāng)代的細(xì)胞定量分析技術(shù),。
 
   工作原理

   將待測(cè)細(xì)胞染色后制成單細(xì)胞懸液。用一定壓力將待測(cè)樣品壓入流動(dòng)室,，不含細(xì)胞的磷酸緩沖液在高壓下從鞘液管噴出,，鞘液管入口方向與待測(cè)樣品流成一定角度，這樣,，鞘液就能夠包繞著樣品高速流動(dòng),，組成一個(gè)圓形的流束，待測(cè)細(xì)胞在鞘液的包被下單行排列,，依次通過(guò)檢測(cè)區(qū)域,。

   流式細(xì)胞儀通常以激光作為發(fā)光源。經(jīng)過(guò)聚焦整形后的光束,，垂直照射在樣品流上,，被熒光染色的細(xì)胞在激光束的照射下，產(chǎn)生散射光和激發(fā)熒光,。這兩種信號(hào)同時(shí)被前向光電二極管和90°方向的光電倍增管接收,。光散射信號(hào)在前向小角度進(jìn)行檢測(cè)，這種信號(hào)基本上反映了細(xì)胞體積的大?。粺晒庑盘?hào)的接受方向與激光束垂直,，經(jīng)過(guò)一系列雙色性反射鏡和帶通濾光片的分離,，形成多個(gè)不同波長(zhǎng)的熒光信號(hào)。

   這些熒光信號(hào)的強(qiáng)度代表了所測(cè)細(xì)胞膜表面抗原的強(qiáng)度或其核內(nèi)物質(zhì)的濃度,，經(jīng)光電倍增管接收后可轉(zhuǎn)換為電信號(hào),，再通過(guò)A／D轉(zhuǎn)換器，將連續(xù)的電信號(hào)轉(zhuǎn)換為可被計(jì)算機(jī)識(shí)別的數(shù)字信號(hào),。計(jì)算機(jī)把所測(cè)量到的各種信號(hào)進(jìn)行計(jì)算機(jī)處理,，將分析結(jié)果顯示在計(jì)算機(jī)屏幕上，液可以打印出來(lái),，還可以數(shù)據(jù)文件的形式存儲(chǔ)在硬盤上以備日后的查詢或進(jìn)一步分析,。

   檢測(cè)數(shù)據(jù)的顯示視測(cè)量參數(shù)的不同由多種形式可供選擇。單參數(shù)數(shù)據(jù)以直方圖的形式表達(dá),，其X軸為測(cè)量強(qiáng)度,，Y軸為細(xì)胞數(shù)目,。一般來(lái)說(shuō)，流式細(xì)胞儀坐標(biāo)軸的分辨率有512或1024通道數(shù),，這視其模數(shù)轉(zhuǎn)換器的分辨率而定,。對(duì)于雙參數(shù)或多參數(shù)數(shù)據(jù)，既可以單獨(dú)顯示每個(gè)參數(shù)的直方圖,，也可以選擇二維的三點(diǎn)圖,、等高線圖、灰度圖或三維立體視圖,。

   細(xì)胞的分選是通過(guò)分離含有單細(xì)胞的液滴而實(shí)現(xiàn)的,。在流動(dòng)室的噴口上配有一個(gè)超高頻電晶體，充電后振動(dòng),，使噴出的液流斷裂為均勻的液滴,，待測(cè)定細(xì)胞就分散在這些液滴之中。將這些液滴充以正負(fù)不同的電荷,，當(dāng)液滴流經(jīng)帶有幾千伏特的偏轉(zhuǎn)板時(shí),，在高壓電場(chǎng)的作用下偏轉(zhuǎn)，落入各自的收集容器中,，不予充電的液滴落入中間的廢液容器,，從而實(shí)現(xiàn)細(xì)胞的分離。

   應(yīng)用范圍

   用于白血病的分型,、腫瘤細(xì)胞染色體的異倍性測(cè)定,，以及免疫學(xué)研究，并已開(kāi)始用于細(xì)菌鑒定,，病毒感染細(xì)胞的識(shí)別和愛(ài)滋病感染者T4,、T8細(xì)胞的記數(shù)。

   70年代以來(lái),，隨著流式細(xì)胞技術(shù)水平的不斷提高,，其應(yīng)用范圍也日益廣泛。流式細(xì)胞術(shù)已普遍應(yīng)用于免疫學(xué),、血液學(xué),、腫瘤學(xué)、細(xì)胞生物學(xué),、細(xì)胞遺傳學(xué),、生物化學(xué)等臨床醫(yī)學(xué)和基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)研究領(lǐng)域。

   技術(shù)特點(diǎn)

   流式細(xì)胞儀作為一種先進(jìn)的細(xì)胞定量分析檢測(cè)儀器,，設(shè)計(jì)上采用了許多*的技術(shù),，其中涉及到液流系統(tǒng)、光路系統(tǒng),、信號(hào)測(cè)量和細(xì)胞分選等4個(gè)方面,。