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如何判斷你的細(xì)胞是何種污染
閱讀:1319 發(fā)布時間:2019-10-9細(xì)胞培養(yǎng)中常見的生物污染類型有7種,分別是細(xì)菌污染,、支原體污染,、原蟲污染、黑膠蟲污染,、真菌污染,、病毒污染以及非細(xì)胞污染。他們在細(xì)胞培養(yǎng)中污染的特點如下:
1.細(xì)菌:細(xì)菌在普通倒置顯微鏡下為黑色細(xì)沙狀,,根據(jù)感染細(xì)菌的不同,,可有不同的外形,培養(yǎng)液一般會渾濁變黃,,對細(xì)胞生長影響明顯,。
2.支原體:黑色的,好象多為多形,,培養(yǎng)液一般培養(yǎng)液一般會渾濁,,原體感染,國內(nèi)血清很多都沒有做支原體陰性檢測,,而支原體是牛血清中zui常見的微生物之一,。而且它不能用過濾的辦法除去。支原體感染細(xì)胞以后,,細(xì)胞病變不很明顯,,只是慢慢死*。
3.黑膠蟲:可以穿透濾膜,,也可以通過空氣傳播,,低倍下為黑色點狀,高倍下可看見黑色的小蟲游來游去,,培養(yǎng)液也是不渾的,,一般不會太影響,細(xì)胞還是可以用的,。常常是細(xì)胞生長狀態(tài)良好,,且觀測到的運動物無明顯增多,且培養(yǎng)液顏色、透明度無明顯變化,,可在同一批號的血清養(yǎng)的細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)類似現(xiàn)象,。對細(xì)胞生長狀態(tài)不會有明顯影響,在細(xì)胞增殖旺盛之后會自然消失,,除更換血清外無須特殊處理,。
4.真菌:一般培養(yǎng)液清亮,不變色,,鏡下有絲狀物,有些真菌開始很像死細(xì)胞碎片,,只是它很多很多的小塊很清楚,,象珊瑚狀,不象細(xì)胞碎片分不清,,慢慢的會長出很細(xì)的黑色絲狀物,。真菌生長的比較慢,不象細(xì)菌那么容易被發(fā)現(xiàn),,但是一旦發(fā)現(xiàn)有它的存在細(xì)胞就被污染了,,也很難救活了。
5.原蟲:培養(yǎng)液可輕微渾濁,,顯微鏡下那些細(xì)小的點狀物數(shù)量非常多,,輕微活動,細(xì)胞雖然可以生長但繁殖速度卻明顯減慢,,而且細(xì)胞狀態(tài)不好,,邊緣不清楚,細(xì)胞不透亮,。他們與細(xì)胞可共生但會與細(xì)胞爭奪營養(yǎng),。這種共生是非常普遍的,但他們的數(shù)量小,,細(xì)胞占優(yōu)勢所以不會影響到細(xì)胞的正常生長,,只有當(dāng)他們到達(dá)一定的數(shù)量時就會影響到細(xì)胞的生長,zui終形成惡性循環(huán),。
6.病毒:組織細(xì)胞培養(yǎng)過程中,,如果沒有除去潛在的病毒,就會產(chǎn)生病毒污染,。目前,,從原代猴腎細(xì)胞的培養(yǎng)中已發(fā)現(xiàn)不少于20種血清性病毒。 盡管病毒污染的細(xì)胞不影響原代培養(yǎng),,但生產(chǎn)疫苗是不安全的,。因此,潛在病毒是細(xì)胞大量生產(chǎn)和疫苗、干擾素等生物制品制作中的難題,。
7.非同種細(xì)胞污染 :即是細(xì)胞交叉污染,,由于細(xì)胞培養(yǎng)操作時各細(xì)胞株所需的器材和溶液沒有嚴(yán)格分開,往往會使一種細(xì)胞被另一種細(xì)胞污染,。目前,,世界上已有幾十種細(xì)胞都被HeLa細(xì)胞所污染,致使許多實驗宣告無效,。非細(xì)胞培養(yǎng)物所造成的化學(xué)成分的污染也偶有發(fā)生,,大多是由于細(xì)胞培養(yǎng)所需物品清洗消毒不*而帶入一些有毒化學(xué)物質(zhì)所致。