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技術(shù)文章

原來ELISA吸光度值衰減可以這樣巧妙應(yīng)對(duì)

閱讀:2016          發(fā)布時(shí)間:2018-2-7

     近日的王老師在操作ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)的時(shí)候發(fā)現(xiàn)了一個(gè)問 題,,于是來電到了我公司的售后部門問道:加完顯色液(購(gòu)買)顯色一定時(shí)間后,再加終止液(2M H2SO4,,自己配制)后,,立即測(cè)試其吸光度值,等過幾分鐘再測(cè)試吸光度值,,發(fā)現(xiàn)兩次測(cè)得的吸光度值發(fā)生衰減,。第二次均小于*次。 并且,加終止液時(shí),,從*條加到第12條后,測(cè)試發(fā)現(xiàn),,吸光度值從1-12條逐級(jí)衰減,。前提是這12條酶標(biāo)板都是同一種產(chǎn)品,并且包被相同蛋白,。

   

     經(jīng)過我公司技術(shù)專員的一番分析解答后,,王老師恍悟道:原來ELISA吸光度值衰減可以這樣巧妙應(yīng)對(duì)。

     

     其實(shí)具體的原因也很簡(jiǎn)單,,有可能是顯色液的質(zhì)量不夠好,。一般情況下,終止反應(yīng)后OD值的下降前期不是很明顯,。終止后,,吸光度值是會(huì)隨著時(shí)間衰減,所以一般是加完終止液后立即測(cè),,這樣比較準(zhǔn),。再次分析12條顯示逐級(jí)遞減的原因看看是否是:

 

① 顯色時(shí)間調(diào)整,如果你現(xiàn)在的顯色時(shí)間是10MIN,,那調(diào)整到30MIN,,再加終止液,觀察上述現(xiàn)象是否出現(xiàn),。

 

② 終止液中加入少量甘油看下怎么樣。

   

     建議您使用BIM品牌的ELISA試劑盒,,顯色時(shí)間是30分鐘,終止后要求在30分鐘內(nèi)檢測(cè),,加入終止液后,在加入終止液后2到3分終內(nèi)檢測(cè),,這是OD值相對(duì)比較高,。擬合值能達(dá)到四個(gè)9。

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