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    常有ELISA操作者抱怨實驗復雜,，而經(jīng)驗豐富的老師們會覺得很簡便,，一是熟能生巧，二是掌握了其中的秘密,。今天上海恒遠帶您來看哪些個高品質小鼠ELISA試劑盒的操作秘密吧：
 

● ELISA秘密重點之加樣：
在ELISA試劑盒中除了包被外,，一般需進行45加樣。在定性測定中有時不強調加樣量的準確性,，此時應該使用相同口徑的滴管,，保持準確的加樣姿勢，使每滴液體的體積基本相同,。在定量測定中則加樣量應力求準確,。標本和結合物的稀釋液應按規(guī)定配制。加樣時應將液體加在孔底,，避免加在孔壁上部,，并注意不可出現(xiàn)氣泡。
 

● ELISA秘密重點之保溫：
在ELISA試劑盒中一般有二次抗原抗體反應,，即加標本后和加結合物后,，此時反應的溫度和時間應按規(guī)定的要求，保溫容器是水浴箱,，可使溫度迅速平衡,。各ELISA板不應疊在一起。為避免蒸發(fā),，板上應加蓋，或將板平放在底部墊有濕紗布的濕盒中,。濕盒應該是金屬的,，傳熱容易。
 

● ELISA秘密重點之洗滌：
    洗滌在ELISA試劑盒過程中不是反應聚,，但卻是決定實驗成敗的關鍵,。洗滌的目的是洗去反應液中沒有與固相抗原或抗體結合的物質以及在反應過程中非特異性吸附于固相載體的干擾物質。洗滌如不*,，特別在zui后一次,，如有酶結合物的非特異性吸附，將使空白值升高,。另外,，在間接法中如血清標本內的非特異性IgG吸附在固相上而未被洗凈，也將與酶標抗體作用而產(chǎn)生干擾。ELISA板的洗滌一般可采用以下方法：
 

1.吸干孔內反應液,；
 

2.將洗滌液注滿板孔,；
   

3.放置2min，略作搖動,；
 

 4.吸干孔內液,，也可傾去液體后在吸水紙上拍干。洗滌的次數(shù)一般為3～4次,，有時甚至需洗5～6次,。
● ELISA實驗操作示意圖：
   
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