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開學(xué)季,恒遠(yuǎn)告訴您ELISA技術(shù)參數(shù)之準(zhǔn)確度
閱讀:2317 發(fā)布時(shí)間:2017-9-8
一、ELISA試劑盒的準(zhǔn)確度
通常以回收率,、定值血清的靶值范圍,、對(duì)照試驗(yàn)及干擾試驗(yàn)的結(jié)果來(lái)分析判斷:
1. 回收試驗(yàn) 回收率越接近100%,準(zhǔn)確率越高,,一般以100%±5%為合格,。
2. 定值血清的測(cè)定 對(duì)于某些無(wú)法準(zhǔn)確加入標(biāo)準(zhǔn)物的試劑盒,可用低,、中,、高濃度的定值血清進(jìn)行測(cè)定,測(cè)得值符合定值血清的靶值范圍(±2S)為合格,。
3. 對(duì)照試驗(yàn) 將被檢試劑盒與*的參考方法同時(shí)測(cè)定若干樣本(一般要求100份,,zui少需30份),計(jì)算兩組結(jié)果的相關(guān)系數(shù)和直線回歸方程,。
4. 非特異性與干擾試驗(yàn) 對(duì)維生素C,、黃疸、溶血、乳糜等因素的耐受程度,,干擾值越小越好,。
二、ELISA試劑盒精密度
試劑的瓶間差異,、批內(nèi)精密度和批間差異三組測(cè)定的平均值之間應(yīng)無(wú)顯著差異,,否則,試劑盒的均一性不符合要求:
1. 瓶間差異:同一試劑盒,,取10瓶試劑復(fù)溶,,測(cè)定同一樣品的含量,求平均值,、標(biāo)準(zhǔn)差,、變異系數(shù)。
2. 批內(nèi)精密度:同一樣品用同一瓶試劑測(cè)定10次,,求平均值,、標(biāo)準(zhǔn)差、變異系數(shù)
3. 批間差異:同一樣品,,用不同批號(hào)的10瓶試劑測(cè)定,,求平均值、標(biāo)準(zhǔn)差,、變異系數(shù)
三,、線性范圍
指該試劑盒按其說(shuō)明使用時(shí)可準(zhǔn)確測(cè)量的范圍。被檢樣品的含量超出測(cè)定線性范圍,,必須改變樣品與試劑體積的比例,,重新測(cè)定才能得到準(zhǔn)確結(jié)果。試劑盒的測(cè)定線性范圍是衡量試劑盒質(zhì)量的一個(gè)指標(biāo),,也是正確使用該試劑盒的關(guān)鍵之一,。
四、抗干擾作用:雙試劑型試劑盒主要優(yōu)點(diǎn)是抗干擾作用,。
五,、靈敏度:在終點(diǎn)法靈敏度以特定波長(zhǎng)下1cm光徑時(shí)單位濃度的吸光度值表示。
六,、穩(wěn)定性
·原包裝試劑的穩(wěn)定性,;
·復(fù)溶后試劑的穩(wěn)定性;
·不同溫度下的保存期,。