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   ELISA試劑盒在國內(nèi)有許多種叫法,，例如：ELISA檢測試劑盒、ELISA Kit,、酶聯(lián)免疫試劑盒,、酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒、酶聯(lián)免疫分析試劑盒,、酶免試劑盒等,，比較常見的叫法是ELISA檢測試劑盒、酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒等,。ELISA試劑盒自從60-70年代問世以來,，得到*科研工作者的認可及推崇，在歐美及中國獲得很大的推廣,，尤其是國內(nèi)生化領(lǐng)域的長足發(fā)展,。今天上海恒遠小編著重帶您了解ELISA試劑盒的包被,！

   說到ELISA包被，可能大多朋友們關(guān)注的是包被的時間與溫度,。間接包被的抗原經(jīng)固相抗體的親和層析作用,，包被在固相上的抗原純度大大提高，因此含雜質(zhì)較多的抗原也可采用捕獲包被法,，試驗的特異性,、敏感性均由此得以改善，重復(fù)性亦佳,。

   蛋白質(zhì)與聚苯乙烯固相載體是通過物理吸附結(jié)合的,，靠的是蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)上的疏水基團與固相載體表面的疏水基團間的作用于?？蓪⒕郾揭蚁┌逑冉?jīng)紫外線照射,，以增加其吸附性能。例如,，在檢測抗DNA抗體時,，需用DNA作為包被抗原，而普遍的固相載體一般不能直接與核酸結(jié)合,。換言之,，包被即是抗原或抗體結(jié)合到固相載體表面的過程。當(dāng)抗原決定簇存在于或鄰近于疏水區(qū)域時,，抗原與固相載體的直接吸附可使抗原決定簇不能充分暴露,，在這種情況下，直接包被效果不佳,，可以采用間接的捕獲包被法,，即先將針對該抗原的特異抗體作預(yù)包被，其后通過抗原抗體反應(yīng)使抗原固相化,。也可用親和素生物素系統(tǒng)作間接包被,，即用親和素先包被載體，然后加入生物素化的DNA,，這種包被方法均勻,、牢固，已擴大應(yīng)用于各種抗原物質(zhì)的定量測定,。

   IgG對聚苯乙烯等固相具有較強的吸附力,，其聯(lián)結(jié)多發(fā)生在Fc段上，抗體結(jié)合點暴露于外,，因此抗體的包被一般均采用直接吸附法,。間接包被的另一優(yōu)點是抗原用量少，僅為直接包被的1/10乃至于/100，這種物理吸附是非特異性的,，受蛋白質(zhì)的分子量,、等電點、濃度等的影響,，抗心磷脂抗體的ELISA試劑盒一般采用這種包被方式。固相載體先用堿性蛋白質(zhì),，如聚賴氨酸,、魚精蛋白等作預(yù)包被，也可提高核酸的結(jié)合力,。

   脂類物質(zhì)無法與固相載體結(jié)合,，可將其在有機溶劑中溶解后加入ELISA板孔中，開蓋置冰箱過一夜或冷風(fēng)吹干,，待酒精揮發(fā)后,，讓脂質(zhì)自然干固在固相表面。載體對不同蛋白質(zhì)的吸附能力是不相同的,，大分子蛋白質(zhì)較小分子蛋白質(zhì)通常含有更多的疏水基團,，故更易吸附到固相載體表面。此間接結(jié)合在固相上的抗原遠離載體表面,，其抗原決定簇也得以充分暴露,。

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