產(chǎn)品名稱:玻璃試管.玻璃試管代理
Elisa試劑盒實驗規(guī)則:
1、將液體加到酶標孔中時,,避免槍頭和孔內液體接觸,,可使槍頭上的液滴和孔壁接觸,,液滴會自然流下去。
2,、液體全部加完后,,可將酶標板在桌子上平行輕輕晃動30秒,混勻液體,。也可以用酶標儀的晃動功能,。
3、溫浴時,,要用不干膠或膠帶紙封好酶標板,,防止水分的蒸發(fā)。
4,、洗板時,,每次洗液加入后,應靜置1分鐘,,使清洗更加*,。沒有洗板機時,倒去液體后,,要將酶標板在報紙或毛紙上用力拍干,。
5、洗液不夠時,,可用蒸餾水自行配制PH7.4,,0.02M的磷酸緩沖液,加入0.1%的吐溫6作為洗液,。加入1/1000的疊氮鈉后可長期保存,。
操作步驟:
用于檢測未知抗體的間接法:
用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1~10μg/ml,每孔加0.1ml,,4℃過夜,。次日洗滌3次。
↓
加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.1ml于上述已包被之反應孔中,置37℃孵育1小時,洗滌,。(同時做空白,、陰性及陽性孔對照)
↓
于反應孔中,加入新鮮稀釋的酶標第二抗體(抗抗體)0.1ml,, 37℃孵育30-60分鐘,,洗滌,zui后一遍用DDW洗滌。
↓
加底物液顯色:于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml,,37℃ 10~30分鐘,。
↓
終止反應:于各反應孔中加入2M硫酸0.05ml。
↓
結果判定:可于白色背景上,,直接用肉眼觀察結果:反應孔內顏色越深,,陽性程度越強,,陰性反應為無色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,,以“+”,、“-”號表示。也可測OD值:在ELISA檢測儀上,,于450nm(若以ABTS顯色,,則410nm)處,以空白對照孔調零后測各孔OD值,,若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.1倍,,即為陽性。