產(chǎn)品名稱:堿性磷酸酶染液,堿性磷酸酶染液報(bào)價(jià)
Elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)規(guī)則:
1、將液體加到酶標(biāo)孔中時(shí),,避免槍頭和孔內(nèi)液體接觸,,可使槍頭上的液滴和孔壁接觸,液滴會(huì)自然流下去,。
2,、液體全部加完后,可將酶標(biāo)板在桌子上平行輕輕晃動(dòng)30秒,,混勻液體,。也可以用酶標(biāo)儀的晃動(dòng)功能。
3,、溫浴時(shí),,要用不干膠或膠帶紙封好酶標(biāo)板,防止水分的蒸發(fā),。
4,、洗板時(shí),每次洗液加入后,,應(yīng)靜置1分鐘,,使清洗更加*。沒有洗板機(jī)時(shí),,倒去液體后,,要將酶標(biāo)板在報(bào)紙或毛紙上用力拍干。
5,、洗液不夠時(shí),,可用蒸餾水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸緩沖液,,加入0.1%的吐溫6作為洗液,。加入1/1000的疊氮鈉后可長(zhǎng)期保存。
操作步驟:
用于檢測(cè)未知抗體的間接法:
用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1~10μg/ml,,每孔加0.1ml,,4℃過夜。次日洗滌3次,。
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加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育1小時(shí),洗滌,。(同時(shí)做空白、陰性及陽性孔對(duì)照)
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于反應(yīng)孔中,,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)第二抗體(抗抗體)0.1ml,, 37℃孵育30-60分鐘,洗滌,zui后一遍用DDW洗滌,。
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加底物液顯色:于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.1ml,,37℃ 10~30分鐘,。
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終止反應(yīng):于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml。
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結(jié)果判定:可于白色背景上,,直接用肉眼觀察結(jié)果:反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深,,陽性程度越強(qiáng),陰性反應(yīng)為無色或極淺,,依據(jù)所呈顏色的深淺,,以“+”、“-”號(hào)表示,。也可測(cè)OD值:在ELISA檢測(cè)儀上,,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,,以空白對(duì)照孔調(diào)零后測(cè)各孔OD值,,若大于規(guī)定的陰性對(duì)照OD值的2.1倍,即為陽性,。