產(chǎn)品名稱:中性酯酶染液,中性酯酶染液報價
Elisa試劑盒實驗規(guī)則:
1,、將液體加到酶標孔中時,避免槍頭和孔內(nèi)液體接觸,,可使槍頭上的液滴和孔壁接觸,,液滴會自然流下去。
2,、液體全部加完后,,可將酶標板在桌子上平行輕輕晃動30秒,,混勻液體。也可以用酶標儀的晃動功能,。
3,、溫浴時,要用不干膠或膠帶紙封好酶標板,,防止水分的蒸發(fā),。
4、洗板時,,每次洗液加入后,,應(yīng)靜置1分鐘,使清洗更加*,。沒有洗板機時,,倒去液體后,要將酶標板在報紙或毛紙上用力拍干,。
5,、洗液不夠時,可用蒸餾水自行配制PH7.4,,0.02M的磷酸緩沖液,,加入0.1%的吐溫6作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長期保存,。
操作步驟:
用于檢測未知抗體的間接法:
用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1~10μg/ml,,每孔加0.1ml,4℃過夜,。次日洗滌3次,。
↓
加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育1小時,洗滌。(同時做空白,、陰性及陽性孔對照)
↓
于反應(yīng)孔中,,加入新鮮稀釋的酶標第二抗體(抗抗體)0.1ml, 37℃孵育30-60分鐘,,洗滌,zui后一遍用DDW洗滌,。
↓
加底物液顯色:于各反應(yīng)孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分鐘,。
↓
終止反應(yīng):于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml,。
↓
結(jié)果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結(jié)果:反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深,,陽性程度越強,,陰性反應(yīng)為無色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,,以“+”,、“-”號表示,。也可測OD值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,,則410nm)處,,以空白對照孔調(diào)零后測各孔OD值,若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.1倍,,即為陽性,。