產(chǎn)品名稱:乳酸脫氫酶(LDH)檢測
檢測方法:比色法
產(chǎn)品規(guī)格:1管
公司主要代理產(chǎn)品:
試劑盒:ELISA試劑盒,、檢測試劑盒,、免疫組化試劑盒、放免試劑盒,、分子生物學(xué)試劑盒,、金標(biāo)檢測試劑盒、Omega試劑盒,、細(xì)胞凋亡試劑盒,、生化試劑盒。
各種動物血清:內(nèi)皮細(xì)胞血清,、Hyclone,、GIBCO胎牛血清。
抗體:進(jìn)口原裝抗體,、進(jìn)口分裝抗體,、單克隆抗體、多克隆抗體,、單標(biāo)抗體,、雙標(biāo)抗體、多標(biāo)抗體,、一抗,、二抗;免疫組化抗體,、免疫熒光抗體,、流式細(xì)胞抗體、免疫細(xì)胞化學(xué)抗體,。
細(xì)胞:*細(xì)胞,、腫瘤細(xì)胞,、正常細(xì)胞、腫瘤耐藥細(xì)胞,。
耗材:細(xì)胞培養(yǎng)耗材,、普通實驗耗材。
生化試劑:*生化試劑,、進(jìn)口分裝生化試劑,。
Elisa實驗前的準(zhǔn)備
1仔細(xì)閱讀說明書
2確定試劑盒在有效期內(nèi)
3按說明書確定所有試劑齊全(數(shù)量、體積)
4標(biāo)本制備要規(guī)范,,每份標(biāo)本體積要按2-3個復(fù)孔以上的量制備(貯存),,盡量分裝做備份。短期內(nèi)無法實驗者,,注意低溫保存
5準(zhǔn)備好所有實驗額外所需物品,,如試管、吸頭,、移液器,、離心機(jī)等
6根據(jù)檢測標(biāo)本數(shù)量確定所需試劑的量
7按說明書將所用試劑平衡至室溫,配制所需試劑
DIY夾心法ELISA常見技術(shù)指南
8選擇抗體時選擇一個單抗和一個多抗進(jìn)行配對,;若選擇兩個單抗,,必須識別不同表位的抗體;從同一家公司選擇抗體對,。
9ELISA實驗中為了確定*信號和zui低背景應(yīng)將捕獲抗體(0.5-4μg/ml)和檢測抗體(0.25-2μg/ml)在預(yù)實驗中進(jìn)行彼此相抗的滴定,。同時,應(yīng)包括在適當(dāng)范圍內(nèi)的標(biāo)準(zhǔn)品的系列稀釋,。按試劑說明書常規(guī)提供的范圍進(jìn)行操作,。
10標(biāo)準(zhǔn)品的配制:對于每種細(xì)胞因子應(yīng)仔細(xì)閱讀說明書,注意每批的細(xì)節(jié),。在使用細(xì)胞因子前,,瞬時離心試劑瓶,盡可能多地收回其中的細(xì)胞因子,。根據(jù)每批說明書中的細(xì)節(jié),將凍干的細(xì)胞因子復(fù)溶,。
11一般待測抗原標(biāo)準(zhǔn)曲線的線性范圍的可通過將標(biāo)準(zhǔn)品做8次2倍系列稀釋從2000pg/ml到15pg/ml,。可利用標(biāo)準(zhǔn)的ELISA操作流程,、放大試劑盒,、第三類試劑、或改變酶底物系統(tǒng)可在一定范圍內(nèi)提高靈敏度,。
12為了優(yōu)化靈敏度,,建議過夜孵育標(biāo)準(zhǔn)品和標(biāo)本,。
13若使用過氧化物酶作為顯色系統(tǒng),應(yīng)嚴(yán)禁在洗液和稀釋液中加疊氮鈉,,疊氮鈉可抑制過氧化物酶的活性,。
14當(dāng)測定混合液體中的抗原時,如血清,,建議在標(biāo)本稀釋液中加不相干的Ig.