產(chǎn)品名稱:ATP酶(鈉鉀,、鈣鎂ATP酶)檢測
檢測方法:比色法
產(chǎn)品規(guī)格:1管
公司主要代理產(chǎn)品:
試劑盒:ELISA試劑盒、檢測試劑盒,、免疫組化試劑盒,、放免試劑盒、分子生物學試劑盒,、金標檢測試劑盒,、Omega試劑盒,、細胞凋亡試劑盒、生化試劑盒,。
各種動物血清:內(nèi)皮細胞血清,、Hyclone、GIBCO胎牛血清,。
抗體:進口原裝抗體,、進口分裝抗體、單克隆抗體,、多克隆抗體,、單標抗體、雙標抗體,、多標抗體,、一抗、二抗,;免疫組化抗體,、免疫熒光抗體、流式細胞抗體,、免疫細胞化學抗體,。
細胞:*細胞、腫瘤細胞,、正常細胞,、腫瘤耐藥細胞。
耗材:細胞培養(yǎng)耗材,、普通實驗耗材,。
生化試劑:*生化試劑、進口分裝生化試劑,。
Elisa實驗前的準備
1仔細閱讀說明書
2確定試劑盒在有效期內(nèi)
3按說明書確定所有試劑齊全(數(shù)量,、體積)
4標本制備要規(guī)范,每份標本體積要按2-3個復(fù)孔以上的量制備(貯存),,盡量分裝做備份,。短期內(nèi)無法實驗者,注意低溫保存
5準備好所有實驗額外所需物品,,如試管,、吸頭、移液器,、離心機等
6根據(jù)檢測標本數(shù)量確定所需試劑的量
7按說明書將所用試劑平衡至室溫,,配制所需試劑
DIY夾心法ELISA常見技術(shù)指南
8選擇抗體時選擇一個單抗和一個多抗進行配對,;若選擇兩個單抗,,必須識別不同表位的抗體,;從同一家公司選擇抗體對。
9ELISA實驗中為了確定*信號和zui低背景應(yīng)將捕獲抗體(0.5-4μg/ml)和檢測抗體(0.25-2μg/ml)在預(yù)實驗中進行彼此相抗的滴定,。同時,,應(yīng)包括在適當范圍內(nèi)的標準品的系列稀釋。按試劑說明書常規(guī)提供的范圍進行操作,。
10標準品的配制:對于每種細胞因子應(yīng)仔細閱讀說明書,,注意每批的細節(jié)。在使用細胞因子前,,瞬時離心試劑瓶,,盡可能多地收回其中的細胞因子。根據(jù)每批說明書中的細節(jié),,將凍干的細胞因子復(fù)溶,。
11一般待測抗原標準曲線的線性范圍的可通過將標準品做8次2倍系列稀釋從2000pg/ml到15pg/ml??衫脴藴实腅LISA操作流程,、放大試劑盒、第三類試劑,、或改變酶底物系統(tǒng)可在一定范圍內(nèi)提高靈敏度,。
12為了優(yōu)化靈敏度,建議過夜孵育標準品和標本,。
13若使用過氧化物酶作為顯色系統(tǒng),,應(yīng)嚴禁在洗液和稀釋液中加疊氮鈉,疊氮鈉可抑制過氧化物酶的活性,。
14當測定混合液體中的抗原時,,如血清,建議在標本稀釋液中加不相干的Ig.