產(chǎn)品名稱:鈉鉀,、鈣鎂ATP酶中任一項(xiàng)檢測(cè)
檢測(cè)方法:比色法
產(chǎn)品規(guī)格:1管
公司主要代理產(chǎn)品:
試劑盒:ELISA試劑盒、檢測(cè)試劑盒,、免疫組化試劑盒,、放免試劑盒、分子生物學(xué)試劑盒,、金標(biāo)檢測(cè)試劑盒,、Omega試劑盒、細(xì)胞凋亡試劑盒,、生化試劑盒,。
各種動(dòng)物血清:內(nèi)皮細(xì)胞血清、Hyclone,、GIBCO胎牛血清,。
抗體:進(jìn)口原裝抗體、進(jìn)口分裝抗體,、單克隆抗體,、多克隆抗體、單標(biāo)抗體,、雙標(biāo)抗體,、多標(biāo)抗體、一抗,、二抗,;免疫組化抗體,、免疫熒光抗體、流式細(xì)胞抗體,、免疫細(xì)胞化學(xué)抗體,。
細(xì)胞:*細(xì)胞、腫瘤細(xì)胞,、正常細(xì)胞,、腫瘤耐藥細(xì)胞。
耗材:細(xì)胞培養(yǎng)耗材,、普通實(shí)驗(yàn)耗材,。
生化試劑:*生化試劑、進(jìn)口分裝生化試劑,。
Elisa實(shí)驗(yàn)前的準(zhǔn)備
1仔細(xì)閱讀說(shuō)明書(shū)
2確定試劑盒在有效期內(nèi)
3按說(shuō)明書(shū)確定所有試劑齊全(數(shù)量,、體積)
4標(biāo)本制備要規(guī)范,每份標(biāo)本體積要按2-3個(gè)復(fù)孔以上的量制備(貯存),,盡量分裝做備份,。短期內(nèi)無(wú)法實(shí)驗(yàn)者,注意低溫保存
5準(zhǔn)備好所有實(shí)驗(yàn)額外所需物品,,如試管,、吸頭、移液器,、離心機(jī)等
6根據(jù)檢測(cè)標(biāo)本數(shù)量確定所需試劑的量
7按說(shuō)明書(shū)將所用試劑平衡至室溫,,配制所需試劑
DIY夾心法ELISA常見(jiàn)技術(shù)指南
8選擇抗體時(shí)選擇一個(gè)單抗和一個(gè)多抗進(jìn)行配對(duì);若選擇兩個(gè)單抗,,必須識(shí)別不同表位的抗體,;從同一家公司選擇抗體對(duì)。
9ELISA實(shí)驗(yàn)中為了確定*信號(hào)和zui低背景應(yīng)將捕獲抗體(0.5-4μg/ml)和檢測(cè)抗體(0.25-2μg/ml)在預(yù)實(shí)驗(yàn)中進(jìn)行彼此相抗的滴定,。同時(shí),,應(yīng)包括在適當(dāng)范圍內(nèi)的標(biāo)準(zhǔn)品的系列稀釋。按試劑說(shuō)明書(shū)常規(guī)提供的范圍進(jìn)行操作,。
10標(biāo)準(zhǔn)品的配制:對(duì)于每種細(xì)胞因子應(yīng)仔細(xì)閱讀說(shuō)明書(shū),,注意每批的細(xì)節(jié)。在使用細(xì)胞因子前,,瞬時(shí)離心試劑瓶,,盡可能多地收回其中的細(xì)胞因子。根據(jù)每批說(shuō)明書(shū)中的細(xì)節(jié),,將凍干的細(xì)胞因子復(fù)溶,。
11一般待測(cè)抗原標(biāo)準(zhǔn)曲線的線性范圍的可通過(guò)將標(biāo)準(zhǔn)品做8次2倍系列稀釋從2000pg/ml到15pg/ml。可利用標(biāo)準(zhǔn)的ELISA操作流程,、放大試劑盒、第三類試劑,、或改變酶底物系統(tǒng)可在一定范圍內(nèi)提高靈敏度,。
12為了優(yōu)化靈敏度,建議過(guò)夜孵育標(biāo)準(zhǔn)品和標(biāo)本,。
13若使用過(guò)氧化物酶作為顯色系統(tǒng),,應(yīng)嚴(yán)禁在洗液和稀釋液中加疊氮鈉,疊氮鈉可抑制過(guò)氧化物酶的活性,。
14當(dāng)測(cè)定混合液體中的抗原時(shí),,如血清,建議在標(biāo)本稀釋液中加不相干的Ig.