詳細(xì)介紹
產(chǎn)品名稱(chēng):大鼠CD44分子試劑盒
英文名稱(chēng):Rat cluster Of differentiation,CD44 ELISA KIT
保存條件:2-8℃
公司名稱(chēng):上海恒遠(yuǎn)生物科技有限公司
檢測(cè)方法:酶聯(lián)免疫法/酶免法(ELISA)
產(chǎn)品用途:科研ELISA檢測(cè)試劑盒.本公司可提供實(shí)驗(yàn)代測(cè)服務(wù).
檢測(cè)原理: 采用雙抗體夾心ABC-ELISA法
產(chǎn)品種屬齊全有:人,,小鼠,大鼠,,豚鼠,,豬,犬,,兔,,牛,羊,,猴,,兔,馬等動(dòng)物種屬,。
待檢樣本:體液,,血清,血漿,,細(xì)胞培養(yǎng)上清液,,尿液,,組織勻漿,心房水標(biāo)本等等。
競(jìng)爭(zhēng)法可用于測(cè)定抗原,,也可用于測(cè)定抗體,。以測(cè)定抗原為例,受檢抗原和酶標(biāo)抗原競(jìng)爭(zhēng)與固相抗體結(jié)合,,因此結(jié)合于固相的酶標(biāo)抗原量與受檢抗原的量成反比,。操作步驟如下:
(1)將特異抗體與固相載體連接,,形成固相抗體,。洗滌。
?。?)待測(cè)管中加受檢標(biāo)本和一定量酶標(biāo)抗原的混合溶液,,使之與固相抗體反應(yīng)。如受檢標(biāo)本中無(wú)抗原,,則酶標(biāo)抗原能順利地與固相抗體結(jié)合,。如受檢標(biāo)本中含有抗原,則與酶標(biāo)抗原以同樣的機(jī)會(huì)與固相抗體結(jié)合,,競(jìng)爭(zhēng)性地占去了酶標(biāo)抗原與固相載體結(jié)合的機(jī)會(huì),,使酶標(biāo)抗原與固相載體的結(jié)合量減少。參考管中只加酶標(biāo)抗原,,保溫后,,酶標(biāo)抗原與固相抗體的結(jié)合可達(dá)zui充分的量。洗滌,。
?。?)加底物顯色:參考管中由于結(jié)合的酶標(biāo)抗原zui多,故顏色zui深,。參考管顏色深度與待測(cè)管顏色深度之差,,代表受檢標(biāo)本抗原的量。待測(cè)管顏色越淡,,表示標(biāo)本中抗原含量越多,。
Elisa間接法、競(jìng)爭(zhēng)法,、捕獲法,,應(yīng)用親和素和生物素的ELISA
親和素是一種糖蛋白,可由蛋清中提取,。分子量60kD,,每個(gè)分子由4個(gè)亞基組成,可以和4個(gè)生物素分子親密結(jié)合?,F(xiàn)在使用更多的是從鏈霉菌中提取的鏈霉親和素,。生物素又稱(chēng)維生素H,,分子量244.31,存在于蛋黃中,。用化學(xué)方法制成的衍生物,,生物素-羥基琥珀亞胺酯(BNHS)可與蛋白質(zhì),、糖類(lèi)和酶等多種類(lèi)型的大小分子形成生物素化的產(chǎn)物,。親和素與生物素的結(jié)合,雖不屬免疫反應(yīng),,但特異性強(qiáng),,親和力大,兩者一經(jīng)結(jié)合就極為穩(wěn)定,。由于1個(gè)親和素分子有4個(gè)生物素分子的結(jié)合位置,,可以連接更多的生物素化的分子,形成一種類(lèi)似晶格的復(fù)合體,。因此把親和素和生物素與ELISA偶聯(lián)起來(lái),,就可大大提高ELISA的敏感度。