詳細介紹
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產(chǎn)品名稱:大鼠基質金屬蛋白酶9/明膠酶B試劑盒
各種種屬:人,、大小鼠、豚鼠,、兔子,、豬、犬,、牛,、羊…
標本齊全:血清、血漿,、細胞培養(yǎng)上清液,、組織勻漿、組織液、關節(jié)液,、胸腔溢液等…
檢測方法:酶聯(lián)免疫法/酶免法(ELISA)
競爭法可用于測定抗原,,也可用于測定抗體。以測定抗原為例,,受檢抗原和酶標抗原競爭與固相抗體結合,,因此結合于固相的酶標抗原量與受檢抗原的量成反比,。操作步驟如下:
?。?)將特異抗體與固相載體連接,形成固相抗體,。洗滌,。
(2)待測管中加受檢標本和一定量酶標抗原的混合溶液,,使之與固相抗體反應,。如受檢標本中無抗原,則酶標抗原能順利地與固相抗體結合,。如受檢標本中含有抗原,,則與酶標抗原以同樣的機會與固相抗體結合,競爭性地占去了酶標抗原與固相載體結合的機會,,使酶標抗原與固相載體的結合量減少,。參考管中只加酶標抗原,保溫后,,酶標抗原與固相抗體的結合可達zui充分的量,。洗滌。
?。?)加底物顯色:參考管中由于結合的酶標抗原zui多,,故顏色zui深。參考管顏色深度與待測管顏色深度之差,,代表受檢標本抗原的量,。待測管顏色越淡,表示標本中抗原含量越多,。
Elisa間接法,、競爭法、捕獲法,,應用親和素和生物素的ELISA
親和素是一種糖蛋白,,可由蛋清中提取。分子量60kD,,每個分子由4個亞基組成,,可以和4個生物素分子親密結合。現(xiàn)在使用更多的是從鏈霉菌中提取的鏈霉親和素,。生物素又稱維生素H,,分子量244.31,,存在于蛋黃中。用化學方法制成的衍生物,,生物素-羥基琥珀亞胺酯(BNHS)可與蛋白質,、糖類和酶等多種類型的大小分子形成生物素化的產(chǎn)物。親和素與生物素的結合,,雖不屬免疫反應,,但特異性強,親和力大,,兩者一經(jīng)結合就極為穩(wěn)定,。由于1個親和素分子有4個生物素分子的結合位置,可以連接更多的生物素化的分子,,形成一種類似晶格的復合體,。因此把親和素和生物素與ELISA偶聯(lián)起來,就可大大提高ELISA的敏感度,。