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產(chǎn)品名稱：大鼠前心鈉肽試劑盒       

各種種屬：人,、大小鼠、豚鼠,、兔子,、豬、犬,、牛,、羊…
標(biāo)本齊全：血清、血漿,、細胞培養(yǎng)上清液,、組織勻漿、組織液,、關(guān)節(jié)液,、胸腔溢液等…
檢測方法：酶聯(lián)免疫法/酶免法（ELISA）
產(chǎn)品用途：For laboratory use only,Not for drug or other uses.本公司可提供免費代測服務(wù).

標(biāo)本的采集及保存 

1. 組織勻漿: 將動物的組織標(biāo)本先用PBS洗滌,去除多余血液,勻漿化后放在20mlPBS中于-20° C放置過夜,第二天,經(jīng)過二次反復(fù)凍融破膜,將勻漿物5000x g離心5分鐘,取上清即可檢測。

2. 細胞培養(yǎng)物上清或其它生物標(biāo)本：請1000 x g離心20分鐘,，取上清即可檢測,，或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融,。

注：以上標(biāo)本置4℃保存應(yīng)小于1周,，-20℃或-80℃均應(yīng)密封保存，-20℃不應(yīng)超過1個月,，-80℃不應(yīng)超過2個月,；標(biāo)本溶血會影響zui后檢測結(jié)果，因此溶血標(biāo)本不宜進行此項檢測,；高血脂的標(biāo)本不需進行特殊處理,，可直接檢測。

操作步驟

實驗開始前,，請?zhí)崆芭渲坪盟性噭?；試劑或樣品稀釋時，均需混勻,，混勻時盡量避免起泡,。每次檢測都應(yīng)該做標(biāo)準(zhǔn)曲線。如樣品濃度過高時,，均應(yīng)用樣品稀釋液進行稀釋,，以使樣品符合試劑盒的檢測范圍。建議各實驗室在操作前先進行預(yù)實驗以建立*稀釋倍數(shù),。

1. 加樣：分別設(shè)空白孔,、標(biāo)準(zhǔn)孔,、待測樣品孔?？瞻卓准訕悠废♂屢?00ul,，余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100ul，注意不要有氣泡,，加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻,，酶標(biāo)板加上蓋或覆膜，37℃反應(yīng)120分鐘,。

為保證實驗結(jié)果有效性,，每次實驗請使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。

2. 棄去液體,，甩干,，不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100ul（在使用前一小時內(nèi)配制）,，37℃,60分鐘,。

3. 溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體,，甩干,，洗板3次，每次浸泡1-2分鐘,，350ul/每孔,，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。 

4. 每孔加檢測溶液B工作液（同檢測A工作液） 100ul,，37℃,，60分鐘。

5. 溫育60分鐘后,，棄去孔內(nèi)液體,，甩干，洗板5次,，每次浸泡1-2分鐘,，350ul/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）,。

6. 依序每孔加底物溶液90ul,，37℃避光顯色（30分鐘內(nèi)，此時肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,，后3-4孔梯度不明顯,，即可終止）。

7. 依序每孔加終止溶液50ul，終止反應(yīng),，此時藍色立轉(zhuǎn)黃色,。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性,，底物反應(yīng)時間到后應(yīng)盡快加入終止液,。

8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度（OD值）。 在加終止液后立即進行檢測,。

注：

1. 每次實驗留一孔作為空白調(diào)零孔（不同于空白孔）,，該孔不加任何試劑，只是zui后加底物溶液及2N H2SO4,。測量時先用此孔調(diào)OD值至零,。 

2. 嚴(yán)格按照規(guī)定的時間和溫度進行溫育以保證準(zhǔn)確結(jié)果。所有試劑都必須在使用前達到室 溫,。使用后立即冷藏保存試劑,。

3. 洗板不正確可以導(dǎo)致不準(zhǔn)確的結(jié)果。在加入檢測溶液B或底物前確保盡量吸干孔內(nèi)液體,。為防止樣品蒸發(fā),，試驗時將反應(yīng)板放于鋪有濕布的密閉盒內(nèi)，酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,，以避免液體蒸發(fā),；洗板后應(yīng)盡快進行下步操作，避免酶標(biāo)板長時間處于干燥狀態(tài),。

4. 消除板底殘留的液體和手指印,，否則影響OD值。

5. 在儲存和溫育時避免強光直接照射,。

6. 未使用完的酶標(biāo)板或者試劑,，請于2-8℃保存。標(biāo)準(zhǔn)品,、檢測溶液A工作液,、檢測溶液B工作液請依據(jù)所需的量配置使用，請精確配置標(biāo)準(zhǔn)品及工作液,，盡量不要微量配置（如吸取檢測溶液A時,，一次不要小于10ul），以避免由于不準(zhǔn)確稀釋而造成的濃度誤差,；檢測液A,、B，以及底物溶液在使用前,，應(yīng)置于37℃溫育30分鐘,；請勿重復(fù)使用已稀釋過的標(biāo)準(zhǔn)品,、檢測溶液A工作液或檢測溶液B工作液。

7. 建議檢測樣品時均設(shè)雙孔測定,，以保證檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性,。

上海恒遠生物科技有限公司是一家專門從事生物技術(shù)相關(guān)產(chǎn)品研發(fā)和銷售的綜合性生命科學(xué)公司，在全體員工的不懈努力和廣大客戶的大力支持下,，公司迅速成長為一家擁有生物試劑部,、實驗及醫(yī)用耗材部、生命科學(xué)儀器部以及技術(shù)服務(wù)部等部門的*,。
我們的理念: 客戶至上,、服務(wù)至真；質(zhì)量*,、誠信為本,。
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大鼠前心鈉肽試劑盒                    大鼠Pro-ANP              elisa原理