詳細(xì)介紹
小鼠羥脯氨酸試劑盒說(shuō)明書(shū) elisa原理 elisa步驟
產(chǎn)品名稱(chēng):小鼠羥脯氨酸試劑盒
英文名稱(chēng):Mouse hydroxyproline,Hyp ELISA KIT
種 屬:小鼠
產(chǎn)品用途: 科研ELISA檢測(cè)試劑盒.提供實(shí)驗(yàn)代測(cè)服務(wù)
產(chǎn)品范圍: 人,小鼠,大鼠,豬,兔,其它動(dòng)物細(xì)胞因子;細(xì)胞凋亡,活性多肽、自身抗體 ,血栓與止血, 骨代謝,肝纖維化,腫瘤,激素內(nèi)分泌,、自身抗體科研ELISA檢測(cè)試劑盒
試劑的準(zhǔn)備
按試劑盒說(shuō)明書(shū)的要求準(zhǔn)備實(shí)驗(yàn)中需用的試劑,。ELISA中用的蒸餾水或去離子水,包括用于洗滌的,,應(yīng)為新鮮的和高質(zhì)量的,。自配的緩沖液應(yīng)用pH計(jì)測(cè)量較正。從冰箱中取出的試驗(yàn)用試劑應(yīng)待溫度與室溫平衡后使用。試劑盒中本次試驗(yàn)不需用的部分應(yīng)及時(shí)放回冰箱保存,。
保溫
在ELISA中一般有兩次抗原抗體反應(yīng),,即加標(biāo)本和加酶結(jié)合物后??乖贵w反應(yīng)的完成需要有一定的溫度和時(shí)間,,這一保溫過(guò)程稱(chēng)為溫育(incubation),有人稱(chēng)之為孵育,,在ELISA中似不恰當(dāng),。ELISA屬固相免疫測(cè)定,抗原,、抗體的結(jié)合只在固相表面上發(fā)生,。以抗體包被的夾心法為例,加入板孔中的標(biāo)本,,其中的抗原并不是都有均等的和固相抗結(jié)合的機(jī)會(huì),,只有zui貼近孔壁的一層溶液中的抗原直接與抗體接觸。這是一個(gè)逐步平衡的過(guò)程,,因此需經(jīng)擴(kuò)散才能達(dá)到反應(yīng)的終點(diǎn),。在其后加入的酶標(biāo)記抗體與固相抗原的結(jié)合也同樣如此。這就是為什么ELISA反應(yīng)總是需要一定時(shí)間的溫育,。溫育常采用的溫度有43℃,、37℃、室溫和4℃(冰箱溫度)等,。37℃是實(shí)驗(yàn)室中常用的保溫溫度,,也是大多數(shù)抗原抗體結(jié)合的合適溫度。在建立ELISA方法作反應(yīng)動(dòng)力學(xué)研究時(shí),,實(shí)驗(yàn)表明,,兩次抗原抗體反應(yīng)一般在37℃經(jīng)1-2小時(shí),產(chǎn)物的可達(dá),。為加速反應(yīng),,可提高反應(yīng)的溫度,有些試驗(yàn)在43℃進(jìn)行,,但不宜采用更高的溫度,。抗原抗體反應(yīng)4℃更為*,,在放射免疫測(cè)定中多使反應(yīng)在冰箱中過(guò)夜,,以形成zui多的沉淀。但因所需時(shí)間太長(zhǎng),,在ELISA中一般不予采用,。保溫的方式除有的ELISA儀器附有特制的電熱塊外,,一般均采用水浴,可將ELISA板置于水浴箱中,,ELISA板底應(yīng)貼著水面,,使溫度迅速平衡。為避免蒸發(fā),,板上應(yīng)加蓋,,也可用塑料貼封紙或保鮮膜覆蓋板孔,此時(shí)可讓反應(yīng)板漂浮在水面上,。若用保溫箱,,ELISA板應(yīng)放在濕盒內(nèi),濕盒要選用傳熱性良好的材料如金屬等,,在盒底墊濕的紗布,,zui后將ELISA板放在濕紗布上。濕盒應(yīng)先放在保溫箱中預(yù)溫至規(guī)定的溫度,,特別是在氣溫較低的時(shí)候更應(yīng)如此,。無(wú)論是水浴還是濕盒溫育,反應(yīng)板均不宜疊放,,以保證各板的溫度都能迅速平衡,。室溫溫育的反應(yīng),操作時(shí)的室溫應(yīng)嚴(yán)格限制在規(guī)定的范圍內(nèi),,標(biāo)準(zhǔn)室溫溫度是指20-25℃,,但具體操作時(shí)可根據(jù)說(shuō)明書(shū)的要求控制溫育。室溫溫育時(shí),,ELISA板只要平置于操作臺(tái)上即可,。應(yīng)注意溫育的溫度和時(shí)間應(yīng)按規(guī)定力求準(zhǔn)確。為保證這一點(diǎn),,一個(gè)人操作時(shí),一次不宜多于兩塊板同時(shí)測(cè)定,。
“ 小鼠羥脯氨酸試劑盒 ”適合檢測(cè)包括血清,、血漿、尿液,、胸腹水,、灌洗液、腦脊液,、細(xì)胞培養(yǎng)上清,、組織勻漿等標(biāo)本,靈敏度*,。我們保證對(duì)所售任何產(chǎn)品一概負(fù)責(zé)到底,,每一份實(shí)驗(yàn)結(jié)果都真實(shí)可靠。