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鎖鏈素(Des)ELISA試劑盒-競爭法

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  • 型號 HY2963-Hu
  • 品牌 其他品牌
  • 廠商性質 生產商
  • 所在地 上海市

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更新時間:2022-08-30 15:20:43瀏覽次數(shù):1462

聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網上看到的信息,,謝謝!

產品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 應用領域 化工,生物產業(yè)
鎖鏈素(Des)ELISA試劑盒-競爭法本試劑盒用于測定血清,,血漿及相關液體樣本中鎖鏈素(Des)的含量。

詳細介紹


實驗原理
本試劑盒應用酶聯(lián)免疫競爭法測定標本中鎖鏈素(Des)水平,。用純化的鎖鏈素(Des)
抗體包被微孔板,,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中加入鎖鏈素(Des),,和 HRP 標記的
鎖鏈素(Des)抗原,,使它們競爭結合,,,經過*洗滌后加底物 TMB 顯色,。樣本顏色的深
淺和樣品中的鎖鏈素(Des)的含量呈負相關。用酶標儀在 450nm 波長下測定吸光度(OD
值),,通過標準曲線計算樣品中鎖鏈素(Des)的含量,。

鎖鏈素(Des)ELISA試劑盒-競爭法標本要求
1.標本處理:(1)水樣 采集后經 -20℃反復凍融三次,再經玻璃纖維過濾后,,備查
(2)組織 樣品用丁醇:甲醇:水(5:25:70 V:V:V)抽提,,或按相
關文獻提取進行,提取后應盡快進行實驗,。若不能馬上進行試驗,,
可將標本放于-20℃保存,備查
2.不能檢測含 NaN3 的樣品,,因 NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性,。

操作步驟
1. 加樣:分別設標準孔、空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,,其余各步操作相同),、
待測樣品孔。在酶標包被板上標準孔中加 50 微升,,待測樣品孔中先加樣品稀釋液 40μl,
然后再加待測樣品 10μl(樣品最終稀釋度為 5 倍),。加樣將樣品加于酶標板孔底部,,盡
量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
2. 加酶:每孔加入酶標試劑 50μl,,空白孔除外,。
3. 溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育 60 分鐘。
4. 配液:將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,,棄去液體,,甩干,每孔加滿洗滌液,,靜置 30 秒后棄去,,如此
重復 5 次,拍干,。
6. 顯色:每孔先加入顯色劑 A50μl,,再加入顯色劑 B50μl,輕輕震蕩混勻,,37℃避光顯色
15 分鐘.
2
7. 終止:每孔加終止液 50μl,,終止反應(此時藍色立轉黃色)。
8. 測定:以空白孔調零,,450nm 波長依序測量各孔的吸光度(OD 值),。 測定應在加終止
液后 15 分鐘以內進行。


計算
以標準物的濃度為橫坐標,,OD 值為縱坐標,,在坐標紙上繪出標準曲線,根據(jù)樣品的
OD 值由標準曲線查出相應的濃度,;再乘以稀釋倍數(shù),;或用標準物的濃度與 OD 值計算出標
準曲線的直線回歸方程式,將樣品的 OD 值代入方程式,,計算出樣品濃度,,再乘以稀釋倍數(shù),
即為樣品的實際濃度,。


鎖鏈素(Des)ELISA試劑盒-競爭法注意事項
1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡 15-30 分鐘后方可使用,,酶標包被板開封后如未
用完,板條應裝入密封袋中保存,。
2.濃洗滌液可能會有結晶析出,,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果,。
3.各步加樣均應使用加樣器,,并經常校對其準確性,以避免試驗誤差,。一次加樣時間最好
控制在 5 分鐘內,,如標本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。
4. 請每次測定的同時做標準曲線,,最好做復孔,。如標本中待測物質含量過高(樣本 OD 值
大于標準品孔第一孔的 OD 值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n 倍)后再測定,,計
算時請最后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5),。
5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染,。
6.底物請避光保存,。
7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準. 8.所有樣品,,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理,。
9.本試劑不同批號組分不得混用。


檢測范圍:
6pg/ml-280pg/ml
規(guī)格:
96 份/盒
保存條件及有效期
1.試劑盒保存:,;2-8℃,。
2.有效期:6 個月


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