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   今天剛上班我司的郭就在閃動,，郭點開一看原來是一位*次的elisa實驗的朋友,，雖然之前參考了大量的文獻，但是在準(zhǔn)備做的時候還是有一點不知所錯,，想請我們幫他歸納一下,。

    其實做elisa實驗并不困難，只要掌握了它的技術(shù)要點,，新手朋友也可以做出的elisa實驗的,。下面是我司技術(shù)專員歸納的實驗技術(shù)要點，大家一起來看看吧,。
    1. 準(zhǔn)備好所有實驗額外所需物品,，如試管、吸頭,、移液器,、離心機等；
    2. 根據(jù)檢測標(biāo)本數(shù)量確定所需試劑的量,；
    3. 按說明書將所用試劑平衡至室溫,，配制所需試劑；
    4. 標(biāo)本制備要規(guī)范,，每份標(biāo)本體積要按2-3個復(fù)孔以上的量制備,，盡量分裝做備份。短期內(nèi)無法實驗者，注意低溫保存,。
    實驗中為了確定*信號和zui低背景應(yīng)將捕獲抗體（0.5-4μg/ml）和檢測抗體（0.25-2μg/ml）在預(yù)實驗中進行彼此相抗的滴定,。同時，應(yīng)包括在適當(dāng)范圍內(nèi)的標(biāo)準(zhǔn)品的系列稀釋,。按試劑說明書常規(guī)提供的范圍進行操作,。
    標(biāo)準(zhǔn)品的配制：對于每種細胞因子應(yīng)仔細閱讀說明書，注意每批的細節(jié),。在使用細胞因子前,，瞬時離心試劑瓶，盡可能多地收回其中的細胞因子,。根據(jù)每批說明書中的細節(jié),，將凍干的細胞因子復(fù)溶。
    一般待測抗原標(biāo)準(zhǔn)曲線的線性范圍的可通過將標(biāo)準(zhǔn)品做8次2倍系列稀釋從2000pg/ml 到15pg/ml,?？衫脴?biāo)準(zhǔn)的ELISA操作流程、放大試劑盒,、第三類試劑、或改變酶底物系統(tǒng)可在一定范圍內(nèi)提高靈敏度,。
    為了優(yōu)化靈敏度,，建議過一夜孵育標(biāo)準(zhǔn)品和標(biāo)本。若使用過氧化物酶作為顯色系統(tǒng),，應(yīng)嚴(yán)禁在洗液和稀釋液中加疊氮鈉,，疊氮鈉可抑制過氧化物酶的活性。當(dāng)測定混合液體中的抗原時,，如血清,，建議在標(biāo)本稀釋液中加不相干的Ig。
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