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上海恒遠分享ELISA試劑盒基本知識
閱讀：682 發(fā)布時間：2015-9-23 ELISA試劑盒應用定性夾心免疫檢測技術,，用合成的HEV多肽抗原包被微孔板板條,，這些多肽是中國型HEV毒株核心氨基酸序列中抗原性很強的肽段,，將樣品或標準品加入孔中并孵育,，如果其中存在HEVIgM抗體，這些抗體就會與HEV的多肽抗原結合,，并固定在上面,，洗板除去其它非特異性抗體和樣品中的其它成份。
問：ELISA試劑盒為什么不將測試范圍延伸到所述的靈敏度?
答：靈敏度是統(tǒng)計中大于零的可測到的zui低值,。它是通過本底信號和試驗的可變性計算出來的。靈敏度是將20個零復制物的中值加兩個標準差從標準曲線換算成分析物的濃度,。而zui低標準是我們可以放心的,、仍可與標準曲線成直線相關的zui低點，因而是可定量的,。
問：ELISA試劑盒試驗原理：
答：ELISA試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA).已知VISFATIN濃度的標準品,、未知濃度的樣品 加入微孔酶標板內進行檢測。洗滌后，加入親和素標記過的HRP,。再經(jīng)過溫育和洗滌,，去除未結合的酶結合物，然后加入底物A,、B,，和酶結合物同時作用。產(chǎn)生顏色,。
問：ELISA試劑盒,，標本檢測血清，肝,，腦,，腎，懷疑是組織是組織液問百分之多少什么是用于組織勻漿,，濃度是多少?
答：組織勻漿,，勻漿按10%，即1組織勻漿加9,，生理鹽水勻漿可以選擇,，也可以選擇，但選擇,，值= 7,。2-7。4,，濃縮液,。
問：當包在zui后的計算，使用一般的試劑盒測試來衡量組織蛋白濃度,，zui后計算,，試劑盒，我們也需要這樣做嗎如何計算?
答：對組織樣品,，我們建議做定量蛋白質,。ELISA試劑盒然后測量結果比蛋白質定量的結果，zui后得到每克含蛋白質的定量指標,，以便更準確!如果小鼠ELISA試劑盒得到不含蛋白質定量,，每克組織的數(shù)量!
封閉是否必要，取決于ELISA的模式及具體的實驗條件,。并非所有的ELISA固相均需封閉,，封閉不當反而會使陰性本底增高。一般說來,，雙抗體夾心法,，只要酶標記物是高活性的,，操作時洗滌*，不經(jīng)封閉也可得到滿意的結果,。特別是用單抗腹水直接包被時,，因其中大量非抗體蛋白在包被時同樣也吸附在固相表面，業(yè)已起到了類似封閉劑的作用,。但在間接法測定中,，封閉一般是不可少的（見2.2.2）。包被好的ELISA板干燥后放入密封袋或錫袋中,，在低溫可保存數(shù)月,。