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保存Abcam抗體的這些要求有哪幾條您不知道,?
閱讀:1512 發(fā)布時(shí)間:2015-5-14進(jìn)口的Abcam抗體大多價(jià)格昂貴,,如保存不當(dāng)除造成的經(jīng)濟(jì)損失以外還可能會(huì)導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)的不成功,直接耽誤科研工作的進(jìn)展,。那我們應(yīng)該如何保Abcam抗體呢,,讓上海恒遠(yuǎn)于您一起來(lái)分享一下。
*,、保存溫度和條件
對(duì)于很多抗體而言,分裝成小等份并凍存于-20℃或-80℃是*保存條件。分裝成小等份可zui大程度減少由凍融造成的損傷,,以及從單個(gè)試劑瓶中多次吸取而引入的污染,。小等份只需凍融一次,如有剩余,,可將剩余物保存于4℃,。在收到抗體時(shí),在10000×g下離心20秒以沉積截留于試劑瓶螺紋的溶液,,并以小等份轉(zhuǎn)移至低蛋白結(jié)合微量離心管中,。小等份的量取決于實(shí)驗(yàn)人員在實(shí)驗(yàn)中通常采用的量。小等份應(yīng)不小于10μl,;等份越小,,儲(chǔ)液濃度因抗體蒸發(fā)及吸附于保存瓶表面而受到的影響越大。
在大多數(shù)情況下,,收到抗體時(shí)在4℃下保存一至兩周,,然后再冷凍進(jìn)行長(zhǎng)期保存是可以接受的,但也許腹水液是例外,,它可能包含蛋白酶,,因而應(yīng)該盡快凍存。同樣,,遵照數(shù)據(jù)表上的建議是重要的.
第二,、用*防止污染
為了防止微生物污染,可將*加入抗體制備品中達(dá)到0.02%(w/v)的終濃度,。很多abcam抗體已經(jīng)包含這種防腐劑,,所用濃度范圍為0.02至0.05%。
第三,、避免反復(fù)凍融
重復(fù)冷凍/融化循環(huán)可使抗體變性,,導(dǎo)致其形成使抗體結(jié)合能力降低的聚集物。
保存于-20℃對(duì)于大多數(shù)抗體是適當(dāng)?shù)?;保存?80℃無(wú)明顯優(yōu)勢(shì),。冰箱不能為無(wú)霜型。這些冷凍和融化之間的循環(huán)(以減少結(jié)霜)恰恰是應(yīng)該避免的,。出于相同原因,,抗體試劑瓶應(yīng)置于具有zui小溫度波動(dòng)的冰箱區(qū)域,例如朝冰箱后部放置而不是置于門(mén)架上,。
有些研究人員加入冷凍保護(hù)劑甘油達(dá)到50%的終濃度以防止冷凍/融化損傷,;甘油可將凝固點(diǎn)降低至低于-20℃。雖然這對(duì)于很多抗體是可接受的,,但是只有一小部分我們提供的抗體測(cè)試了在該保存條件下的穩(wěn)定性,,并且我們的保證僅使用于按數(shù)據(jù)表上推薦的方式保存的抗體,。不建議將包含甘油的溶液保存于-80℃,因?yàn)樵摐囟鹊陀诟视偷哪厅c(diǎn),。請(qǐng)注意甘油可被細(xì)菌污染,。如果加入甘油或任何冷凍保護(hù)劑,則應(yīng)當(dāng)小心操作,,以得到無(wú)菌制備物,。
應(yīng)避免抗體在稀釋至工作濃度后在4℃下保存超過(guò)一天。蛋白質(zhì)在高濃度下保存時(shí)一般不易降解,,理想的濃度為1mg/ml或更高,。這是在抗體溶液中加入蛋白質(zhì)例如BSA作為穩(wěn)定劑的理論基礎(chǔ)。加入的蛋白質(zhì)也有助于減少抗體因結(jié)合于容器壁上而造成的損失,。對(duì)于打算進(jìn)行偶聯(lián)的抗體而言,,由于穩(wěn)定蛋白質(zhì)會(huì)與抗體競(jìng)爭(zhēng),降低了偶聯(lián)的效率,,所以不應(yīng)加入穩(wěn)定蛋白質(zhì),。
以上幾點(diǎn)保存Abcam抗體的這些要求有哪幾條您不知道?針對(duì)以上要求,、方法,,同樣也適用于其他抗體,希望我們的這些建議對(duì)您的實(shí)驗(yàn)也幫助,,上海恒遠(yuǎn)祝您實(shí)驗(yàn)成功,。