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技術(shù)部對酶聯(lián)免疫雙位點一步法評價
閱讀:1411 發(fā)布時間:2014-10-24 通常每周五上海恒遠都有資訊分享給大家,我公司今天要給大家?guī)淼膬?nèi)容是實驗室技術(shù)部對酶聯(lián)免疫雙位點一步法的評價,,夏將此具體內(nèi)容整理出,發(fā)布出分享給大家,。
·操作步驟
1.將1個McAb與固相載體連接,,形成固相McAb。洗滌除去未結(jié)合物,。
2.同時加入待檢標本和酶標McAb,,溫育,是待檢抗原和固相McAb及酶標McAb反應(yīng)形成雙抗體夾心復(fù)合物,。洗滌除去未結(jié)合物,。
3.加底物顯色。
適用于雙抗體夾心法的酶聯(lián)免疫試劑盒,,有些也可用雙位點一步法檢測,。如HBsAg同樣可用此法進行檢測,其原理為:將純化的抗HBs吸附于固相載體表面,加入待檢血清(或血漿),,同時加入辣根過氧化物酶標記的另一個抗HBs(酶結(jié)合物),,如血清或血漿中含有HBsAg,則通過溫育形成固相McAb-HBsAg-酶標McAb復(fù)合物,,加入底物,,通過顯色反應(yīng)進行測定。若血清或血漿中不含HBsAg,,通過洗滌除去未結(jié)合物,,加底物后就不顯色。
上海恒遠技術(shù)部做出評價:“由于應(yīng)用McAb,,雙位點一步法具有很高特異性,,一步法省時、簡便,。當待檢抗原濃度過高時,,大量過剩抗原分別飽和固相McAb和酶標McAb而抑制夾心復(fù)合物的形成,,這種現(xiàn)象稱為鉤狀效應(yīng),,可出現(xiàn)假陰性結(jié)果??蓪⒋龣z標本稀釋后再做或提高抗體試劑的親和力,、濃度、純度定以消除鉤狀效應(yīng),。”
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