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恒遠(yuǎn)介紹：使用動(dòng)物血清來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)方法
閱讀：932 發(fā)布時(shí)間：2014-5-15 今天就是本月的中旬標(biāo)記啦，點(diǎn)擊我公司的資訊動(dòng)態(tài)中回顧一下能夠看到,，在這半個(gè)月以來(lái),，上海恒遠(yuǎn)主要給朋友們介紹到了動(dòng)物血清、中檢所標(biāo)準(zhǔn)品,、酶聯(lián)免疫試劑盒,，這三種產(chǎn)品也是我公司的主營(yíng)產(chǎn)品。下面就來(lái)看看我們今天的主要內(nèi)容吧,，血管平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)方法之貼塊法,，我們就主要來(lái)看看貼塊法。
動(dòng)物經(jīng)頸動(dòng)脈放血后,，在無(wú)菌操作下迅速取出胸腹主動(dòng)脈段,，置于含Hank'；s液的平皿中漂洗3次,，將凝塊洗干凈后剝除外膜的纖維脂肪層,，然后縱行切開(kāi)血管，刮除內(nèi)膜即內(nèi)皮細(xì)胞迅速撕下中膜內(nèi),、中層,，切成約1mm寬的小條，浸泡在含血清的Hank',；s液中,，并將撕下小組織塊種植于培養(yǎng)瓶壁。置于37℃恒溫箱,，2h左右,，取出培養(yǎng)瓶加入20%動(dòng)物血清的培養(yǎng)液，再放回培養(yǎng)箱內(nèi)靜止培養(yǎng)4天,。4天后可見(jiàn)細(xì)胞從組織中遷移游出,。
不同動(dòng)物血管結(jié)構(gòu)有差異，豬和猴較易操作,，但小動(dòng)物如兔,、鼠因其血管小，血管壁薄等特點(diǎn),，使之難以分離,。另外組織塊太薄，不易粘附培養(yǎng)基,，也使細(xì)胞較難生長(zhǎng),。
那么我們要怎樣去避免培養(yǎng)不成功呢？上海恒遠(yuǎn)生物建議您在本次實(shí)驗(yàn)中需要注意：
1,、種植組織塊的數(shù)目,，如75cm2的長(zhǎng)頸瓶組織塊不得少于30 ,；
2、根據(jù)培養(yǎng)細(xì)胞的種屬加入適量的不同血清,，一般可加入胎牛血清,，若小牛血清增殖效果差，應(yīng)加胎牛血清（我公司是專(zhuān)業(yè)代理GIBCO,、NQBB胎牛血清的供應(yīng)商,，代理，提供全程技術(shù)指導(dǎo)）,，通常濃度為10%～20%,；
3,、培養(yǎng)基的選擇：常用的有DMEM,，M199培養(yǎng)基。培養(yǎng)兔的平滑肌細(xì)胞用DMEM效果較好,。
以上就是使用動(dòng)物血清來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)方法了,，上海恒遠(yuǎn)產(chǎn)品優(yōu)勢(shì)：*、完善,、穩(wěn)定,，提供全程實(shí)驗(yàn)技術(shù)指導(dǎo)。