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【原理】 肺炎支原體快速檢測卡可檢測血清中的肺炎支原體lgM抗體,。患者的血清樣品分別加入兩個(gè)測試孔內(nèi),，當(dāng)樣品沿膜擴(kuò)散時(shí),，分別加入3滴抗人lgM堿性磷酸酶復(fù)合物、3滴洗液和2滴底物,，5分鐘后觀察結(jié)果,。質(zhì)控孔為質(zhì)量控制，固定有人lgM,，測試孔固定有肺炎支原體抗原,。陽性反應(yīng)結(jié)果為藍(lán)色，陰性結(jié)果為無色,。

【材料】

1,、患者血清。

2,、肺炎支原體lgM檢測試劑盒,，包括：

（1）檢測卡：單獨(dú)錫紙包裝，卡上固定有肺炎支原體抗原或人lgM（質(zhì)控孔）,。

（2）陽性質(zhì)控液（1.7ml）：含有人抗肺炎支原體lgM的0.1%疊氮鈉緩沖液。

（3）陰性質(zhì)控液（1.7ml）：0.1%疊氮鈉緩沖液,。

（4）酶結(jié)合物：（11ml）：含有以堿性磷酸酶標(biāo)記的抗人lgM單克隆抗體的0.1%疊氮鈉緩沖液,。

（5）洗液：9.5%（W/V）的呱基氫氯酸。

（6）底物（15ml）：含有5-溴-4-氯-3-吲哚磷酸的0.1%疊氮鈉的緩沖液,。

（7）移液管,。

【樣本處理】血清樣品2—8℃可保存3天，如果不能在此期間測試，-20℃保存,，樣品不宜反復(fù)凍融,。

【操作】

1、從冰箱中取出試劑盒,，置室溫平衡20分鐘,。

2、從錫紙袋中取出檢測卡,，作好標(biāo)記,。

3、用移液管滴加2滴血清到卡下端兩個(gè)測試孔中,。

4,、22—25℃下孵育2分鐘。2分鐘內(nèi)血清應(yīng)沿膜擴(kuò)散至上端的測試孔中,。

5,、加入3滴酶結(jié)合物到下端兩個(gè)測試孔中，22—25℃下孵育2分鐘,，酶結(jié)合物應(yīng)沿膜擴(kuò)散至上端的測試孔中,。

6、加入3滴洗液到上端兩個(gè)測試孔中,，等待*吸收,。

7、滴加2滴底物試劑到上端兩個(gè)測試孔,，22—25℃下孵育5分鐘,，5分鐘后立即觀察反應(yīng)結(jié)果。

【結(jié)果】  根據(jù)上端兩個(gè)反應(yīng)孔的反應(yīng)結(jié)果判斷：

陽性結(jié)果：上端兩孔都出現(xiàn)藍(lán)色,。提示肺炎支原體性lgM存在,。

陰性結(jié)果：質(zhì)控孔出現(xiàn)藍(lán)色或輕微藍(lán)色，測試孔無色或呈暗灰色,，提示不存在肺炎支原體lgM或其濃度在檢測下限之下,。

無效反應(yīng)：質(zhì)控孔不出現(xiàn)藍(lán)色。產(chǎn)生無效反應(yīng)的可能原因?yàn)椋涸噭┗驒z測卡質(zhì)量問題,，操作不當(dāng),，樣品擴(kuò)散不好，酶結(jié)合物嚴(yán)重污染,，血清中含有過多脂質(zhì)成分等,。無污染血清可離心后再次測試 。

【特異性】該試劑盒與下列因素不發(fā)生交叉反應(yīng)：腺病毒,、風(fēng)濕因子,、呼吸道合胞病毒,、抗核抗體、流感病毒A型和B型,、副流感病毒3型,、組織胞漿菌、巨細(xì)胞病毒等,。