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溫習一下:這些不能忽略小細節(jié)千萬
閱讀:1239 發(fā)布時間:2018-4-3 大多數人在實驗的過程中,,是否都有過一些您明明知道,但卻總是不以為意的小細節(jié)呢,?直到實驗結果不太理想時才會想著去找那些原因,,但是您我都知道這樣是不好的。所以為了引起您的重視,,小編還是來給您再次溫習一下,!
一 記錄
人的記憶力是有限的,在做實驗的時候,,不可能記住做過的每一步,。例如實驗記錄如果不及時寫,,第二天就會忘記很多,,一周之后就*忘記了,。所以做實驗一定要做好實驗記錄。記錄一要及時,,否則就會忘記,,是隨時記錄。二要詳細,,因為一個很小的細節(jié)可能就是實驗失敗或者成功的原因,,如果沒有記下這個細節(jié), 實驗出問題了就難以找到原因,。 例如做實驗用的試劑是哪一瓶,,什么時候配的(尤其是容易失效的試劑),如果是用 PBST 配的 5%BSA,,加了0.02%的 Sodium Azide 抑制微生物生長,,就應該記錄為5%BSA.PBST.N3Na,而是5%BSA,。三要整潔,,如果過于潦草,看起來很不方便,,需要找相關信息的時候就難以找到,。配好的試劑做好標簽也是一種記錄,標簽一定要詳細:包括試劑名稱,、配置日期,、配置者及其它必要信息。在配試劑的時候,,為了防止忘記貼標簽的情況,,應該先貼標簽,再加試劑,。電子記錄有易于檢索的優(yōu)點,,對于某些重要信息,可以記錄到電子文檔(例如 word 文檔)里面,。
二 核查
很多時候,,我實驗失敗的原因是沒有仔細核查,例如沒有核查果蠅的表型,,沒有仔細檢查試劑的標簽,,沒有核查離心機的轉速,沒有檢查 heat block 的溫度等等,。每一個小錯誤都可能導致實驗失敗,,所以一定要養(yǎng)成仔細核查的習慣。具體來說,,在加試劑的時候,,一定要仔細核查標簽(包括試劑名稱,、 配置日期),是否有沉淀,,顏色是否改變等,;使用儀器的時候, 要核查設置,, 例如溫度,、 轉速、 時間設置等,; 電泳的時候,, 要核查是否有氣泡冒出; 使用實驗動物的時候,,要核查表型等,。
三 分裝
諺語說:不要把所有雞蛋都放到同一個籃子里。同樣,,在做實驗的時候,,有時也不要 把所有試劑都放到同一個容器里。分裝有很多好處,。*,,保險??梢苑乐挂驗槲廴?、變質等原因損失全部試劑或者樣品。第二,,容易混勻,。結冰的試劑需要全部溶解然后 vortex 才可以混勻,如果很大體積,,有時會等不及全部溶解 就開始加樣,,會導致濃度不均。一般 溶液都是先溶解溶質濃度高的,,就像是結冰的汽水一邊融化一邊喝,,一開始很甜,zui后幾乎 沒有甜味了,,是因為糖份的存在會降 低熔點,,含糖量高的先溶解了。分裝后,,每一管溶液 量小,,解凍時容易全部溶解。注意在分裝的時候一定要全部溶解并充分混勻。第三,,延長保質期,。很多試劑都要低溫保存。如果不分裝,,每次使用的時候都全部受熱一次,,變質就會很快,。分裝之后,,每次使用只有少量試劑受熱,其它的還可以繼續(xù)保持于低溫,,可以延長使用壽 命,。抗體,、體積較大的酶,、熱不穩(wěn)定的其它試劑等分裝保存于-20 度或者更低的溫度。
四 混勻實驗對很多試劑的用量都有明確要求,。要保證實驗的成功和可重復性,,必須保證試劑用量一致。用量等于體積乘以濃度,,如果溶液不混勻的話,,濃度就會不同,即使加樣體積一樣,,實際的量也可能不一樣,。所以,一定要保證試劑是充分混勻,。結冰的試劑,,必須*溶解才可以使用。 容易沉淀的試劑,, 使用之前必須充分vortex 后再快速離心一下才能使用,。
五 備份
在《At the bench》一書里,作者說如果實驗室發(fā)生起火等危急情況,,首先應該搶救的不是試劑,,而是實驗記錄。因為有了實驗記錄才可以完成論文,。其實,,為了防止實驗記錄丟失的情況,可以把實驗記錄掃描為PDF文檔以備份,。同時,,對于重要的研究數據,整理成電子文檔例如 excel 或 word 文檔,,并且養(yǎng)成對自己的電腦文件定期備份的習慣,。此外,,質粒、轉化后的細菌也需要備份,。備份兩份以降低丟失的概率,。