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  ELISA是酶聯(lián)接免疫吸附劑測(cè)定（ Enzyme-Linked Immunosorbnent Assay ）的簡(jiǎn)稱,。它是繼免疫熒光和放射免疫技術(shù)之后發(fā)展起來(lái)的一種免疫酶技術(shù),。此項(xiàng)技術(shù)自70年代初問世以來(lái)，發(fā)展十分迅速,，目前已被廣泛用于生物學(xué)和醫(yī)學(xué)科學(xué)的許多領(lǐng)域。ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)雖然具有檢測(cè)時(shí)間短,，操作非常簡(jiǎn)便的優(yōu)點(diǎn),，但是其實(shí)驗(yàn)的結(jié)果的影響因素也是有很多,，所以實(shí)驗(yàn)過程中一定要多加注意,。今天，上海恒遠(yuǎn)生物為大家分享ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)的哪些禁忌,，希望可以給您的實(shí)驗(yàn)帶來(lái)幫助,。

 

實(shí)驗(yàn)禁忌：

    1.加樣后及時(shí)放人孵箱,，標(biāo)本較多時(shí),，要分批操作。按說(shuō)明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間,，防止孵育時(shí)間人為延長(zhǎng),，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍，難以清洗*,。

    2.作時(shí)必須戴手套,，穿工作衣，嚴(yán)格健全和執(zhí)行消毒隔離制度,。

    3.剩余樣品及廢棄物應(yīng)經(jīng)121℃高壓蒸汽滅菌30分鐘,，或用5.0g/L次氯酸鈉等消毒劑處理30分鐘后廢棄。

    4.同批號(hào)試劑組分不得混用,。

    5.洗滌時(shí)各孔均需加滿液體，防止孔口有游離酶不能洗凈,。

    6.每次實(shí)驗(yàn)留一孔作為空白調(diào)零孔，該孔不加任何試劑,，只是zui后加底物溶液及2N H2SO4。測(cè)量時(shí)先用此孔調(diào)OD值至零。

    7.要確保微量加樣器的準(zhǔn)確性,，可以使用蒸餾水和電子天平進(jìn)行確定(由于蒸餾水不含雜質(zhì),，溫度環(huán)境為20%左右時(shí),，lmL的水可以看作是lg,、200 L的水可以看作是0.2g)每一把微量加樣器都應(yīng)該將其zui高量程和zui低量程進(jìn)行確定,。

    8.在使用微量加樣器時(shí)，吸取不同瓶子中液體后要更換槍頭,，即使吸取標(biāo)準(zhǔn)品溶液。

    9.吸取液體時(shí)速度不易太快,，以免產(chǎn)生氣泡，吸取的量不夠準(zhǔn)確,。

    10.手工洗板時(shí)每次加入洗滌液后。應(yīng)靜置15～30s,，不要將一個(gè)酶標(biāo)孑L中的洗滌液濺入另一酶標(biāo)孔中,，防止交叉污染,。甩去洗滌液后將酶標(biāo)板放在毛巾或吸水紙上拍干,。

    11.底物為TMB,，避免與皮膚相接觸,。終止液為2tool的濃硫酸具有腐蝕性，應(yīng)盡量避免接觸皮膚,。

 

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