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酸水解法測(cè)定脂肪操作方法
閱讀：3909 發(fā)布時(shí)間：2012-11-7| 提 供 商 | 上海恒遠(yuǎn)生物科技有限公司 | 資料大小 | 27KB |
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酸水解法測(cè)定脂肪
內(nèi)容摘要：酸水解法適用于各類食品中脂肪的測(cè)定,，對(duì)固體,、半固體、黏稠液體或液體食品,，特別是加工后的混合食品,，容易吸濕、結(jié)塊,，不易烘干的食品,，不能采用索氏提取法時(shí)，用此法效果較好。
1．酸水解法原理
強(qiáng)酸與樣品一同加熱進(jìn)行水解,，結(jié)合或包藏在組織里的脂肪可游離出來,，然后用乙迷和石油醚提取脂肪，回收溶劑,，除去溶劑后即為脂肪含量,。
2．儀器
①100 mL具塞刻度量筒。
②烘箱,。
3．試劑
①95％乙醇,。
②乙迷（不含過氧化物）。
③石油醚（30~60℃沸程）,。
④濃鹽酸,。
4．測(cè)定步驟
①樣品處理
a．固體樣品：準(zhǔn)確稱取約2．0 g，置于50 mL試管中,，加8 mL水,，混勻后再加10 mL濃鹽酸。
b．液體樣品：準(zhǔn)確稱取10.0 g置于50mL試管中,，加10 mL,，濃鹽酸。
②水解：將試管放入70~80℃水浴中,，每隔5～10 min用玻璃棒攪拌一次,，至樣品脂肪游離消化*為止，時(shí)間約需40~50 rain,。水解過程中,，如水分蒸發(fā)，應(yīng)適當(dāng)補(bǔ)加水,，保持溶液總體積不變，以避免酸濃度升高,。
③提?。喝〕鲈嚬埽尤?/span>10 mL乙醇,，混合,。冷卻后將混合物移人100 mL具塞量筒中，用25 mL乙迷分次洗試管,，洗液一并倒人量筒中,。加塞振搖1 rain，小心開塞放出氣體,，再塞好,，靜置12 min，小心開塞，用石油醚一乙迷等量混合液沖洗塞及筒口附著的脂肪,。靜置10~20min,，待上部液體澄清，吸出上清液于已恒重的燒瓶?jī)?nèi),，再加5 mL石油醚一乙迷等量混合液于具塞量筒內(nèi),，振搖，靜置后,，仍將上層乙迷吸出,，放人原燒瓶?jī)?nèi)。
④回收溶劑,、烘干,、稱重：回收燒瓶?jī)?nèi)乙迷后，將燒瓶于水浴上蒸干后,，置100~105℃烘箱中干燥2 h,，取出放進(jìn)干燥器內(nèi)，冷卻30 min后稱重,，反復(fù)干燥冷卻操作至恒重,。
5.說明
①測(cè)定的樣品需充分磨細(xì)，液體樣品需充分混合均勻,，以使消化*,。
②水解后加的乙醇可使蛋白質(zhì)沉淀，促進(jìn)脂肪球聚合,，同時(shí)溶解一些碳水化合物,、有機(jī)酸等。后面用乙迷提取,，因乙醇可溶于乙迷,，故需加入石油醚，降低乙醇在醚中的溶解度,，使乙醇溶解物殘留在水層,，并使分層清晰。
③揮干溶劑后,，殘留物中若有黑色焦油狀雜質(zhì),，是分解物與水一同混入所致，會(huì)使測(cè)定值增大,，造成誤差,，可用等量的乙迷及石油醚溶解后過濾，再次進(jìn)行揮干溶劑的操作,。
④因磷脂在酸水解條件下分解為脂肪酸和堿,，故本法不宜用于測(cè)定含有大量磷脂的食品如魚類、貝類和蛋品。此法也不適于含糖高的食品,，因糖類遇強(qiáng)酸易碳化而影響測(cè)定結(jié)果,。