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人T細(xì)胞淋巴瘤病毒 （T-CLV）試劑盒使用說明書
閱讀：499 發(fā)布時(shí)間：2017-3-3| 提 供 商 | 上海恒遠(yuǎn)生物科技有限公司 | 資料大小 | 126.2KB |
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人T細(xì)胞淋巴瘤病毒 （T-CLV）酶聯(lián)免疫分析
試劑盒使用說明書
本試劑盒僅供研究使用。
96T
使用目的：
本試劑盒用于測定人血清,、血漿及相關(guān)液體樣本中T 細(xì)胞淋巴瘤病毒 （T-CLV）表達(dá),。
實(shí)驗(yàn)原理
本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中人T 細(xì)胞淋巴瘤病毒 （T-CLV）表達(dá)。用純化的人
T 細(xì)胞淋巴瘤病毒 （T-CLV）抗體包被微孔板,，制成固相抗體,，可與樣品中T 細(xì)胞淋巴瘤
病毒 （T-CLV）相結(jié)合，經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的抗原和其他成分后再與HRP 標(biāo)記的T 細(xì)胞淋
巴瘤病毒 （T-CLV）抗體結(jié)合,，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,，經(jīng)過*洗滌后加底物
TMB 顯色。TMB 在HRP 酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色,。用
酶標(biāo)儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值），與CUTOFF 值相比較,，從而判定標(biāo)本中人T
細(xì)胞淋巴瘤病毒 （T-CLV）的存在與否,。
試劑盒組成
1 30 倍濃縮洗滌液 20ml×1 瓶 7 終止液 6ml×1 瓶
2 酶標(biāo)試劑 6ml×1 瓶 8 陽性對(duì)照 0.5ml×1 瓶
3 酶標(biāo)包被板 12 孔×8 條 9 陰性對(duì)照 0.5ml×1 瓶
4 樣品稀釋液 6ml×1 瓶 10 說明書 1 份
5 顯色劑A 液 6ml×1 瓶 11 封板膜 2 張
6 顯色劑B 液 6ml×1/瓶 12 密封袋 1 個(gè)
標(biāo)本要求
1．標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn),。若不能
馬上進(jìn)行試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保存,，但應(yīng)避免反復(fù)凍融
2．不能檢測含NaN3 的樣品,，因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。
操作步驟
1. 編號(hào)：將樣品對(duì)應(yīng)微孔按序編號(hào),，每板應(yīng)設(shè)陰性對(duì)照2 孔,、陽性對(duì)照2 孔、空白對(duì)照1
孔（空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,，其余各步操作相同）
2. 加樣：分別在陰,、陽性對(duì)照孔中加入陰性對(duì)照、陽性對(duì)照50μl,。然后在待測樣品孔先
加樣品稀釋液40μl,，然后再加待測樣品10μl。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,，盡量不
觸及孔壁,，輕輕晃動(dòng)混勻，
3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30 分鐘,。
4. 配液：將30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水30 倍稀釋后備用
5. 洗滌：小心揭掉封板膜,，棄去液體，甩干,，每孔加滿洗滌液,，靜置30 秒后棄去,，如此
重復(fù)5 次，拍干,。
6. 加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,，空白孔除外。
7. 溫育：操作同3,。
8. 洗滌：操作同5,。
9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl,，輕輕震蕩混勻,，37℃避光顯色
15 分鐘.
10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）,。
11. 測定：以空白空調(diào)零,，450nm 波長依序測量各孔的吸光度（OD 值）。 測定應(yīng)在加終止
液后15 分鐘以內(nèi)進(jìn)行,。
操作程序總結(jié)：
計(jì)算和結(jié)果判定：
試驗(yàn)有效性：陽性對(duì)照孔平均值≥1.00; 陰性對(duì)照平均值≤0.10
臨界值（CUT OFF）計(jì)算：臨界值=陰性對(duì)照孔平均值+0.15
陰性判定：樣品OD 值< 臨界值（CUT OFF）者為T 細(xì)胞淋巴瘤病毒 （T-CLV）陰性
陽性判定：樣品OD 值≥ 臨界值（CUT OFF）者為T 細(xì)胞淋巴瘤病毒 （T-CLV）陽性
,。
注意事項(xiàng)
1．操作嚴(yán)格按照說明書進(jìn)行，本試劑不同批號(hào)組分不得混用,。
2．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30 分鐘后方可使用,，酶標(biāo)包被板開封后如未
用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存,。
3．濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶，洗滌時(shí)不影響結(jié)果,。
4． 封板膜只限一次性使用,，以避免交叉污染。
5．底物請(qǐng)避光保存,。
6．試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn),，使用雙波長檢測時(shí),，參考波長為630nm
7．所有樣品,，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。終止液為2M 的硫酸,，使用時(shí)必須
注意安全,。
保存條件及有效期
1．試劑盒保存：；2-8℃,。
2．有效期：6 個(gè)月