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Elisa檢測(cè)雙抗體夾心法原理介紹
閱讀:959 發(fā)布時(shí)間:2015-6-3提 供 商 | 上海恒遠(yuǎn)生物科技有限公司 | 資料大小 | 22KB |
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雙抗體夾心法原理:固相載體上包被抗體,,再加入待測(cè)抗原(可以是血清或者其它樣本),洗板(洗掉非特異性吸附),,再加入酶標(biāo)抗體,,再洗板(洗掉非特異性吸附),再加底物顯色,。這里有幾點(diǎn)需要注意:①抗原是大分子抗原,,具有2個(gè)以上的抗原表位;②包被抗體和酶標(biāo)記的抗體都是針對(duì)抗原的特異性抗體,,只不過它們分別針對(duì)的是不同抗原表位,,經(jīng)常被稱作一抗和二抗;③酶是催化底物顯色的,,起到一個(gè)信號(hào)放大作用,。
操作步驟:
1.將特異性抗體與固相載體聯(lián)結(jié),形成固相抗體,。洗滌除去未結(jié)合的抗體及雜質(zhì),。
2.加受檢標(biāo)本,保溫反應(yīng),。標(biāo)本中的抗原與固相抗體結(jié)合,,形成固相抗原抗體復(fù)合物。洗滌除去其他未結(jié)合物質(zhì),。
3.加酶標(biāo)抗體,,保溫反應(yīng)。固相免疫復(fù)合物上的抗原與酶標(biāo)抗體結(jié)合,。*洗滌未結(jié)合的酶標(biāo)抗體,。此時(shí)固相載體上帶有的酶量與標(biāo)本中受檢抗原的量相關(guān)。
4.加底物顯色,。固相上的酶催化底物成為有色產(chǎn)物,。通過比色,測(cè)知標(biāo)本中抗原的量,。