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    1.準(zhǔn)備好所有實(shí)驗(yàn)額外所需物品，如試管,、吸頭,、移液器、離心機(jī)等,；

    2.根據(jù)檢測(cè)標(biāo)本數(shù)量確定所需試劑的量,；

    3.按說明書將所用試劑平衡至室溫，配制所需試劑,；

    4.標(biāo)本制備要規(guī)范,，每份標(biāo)本體積要按2-3個(gè)復(fù)孔以上的量制備，盡量分裝做備份,。短期內(nèi)無法實(shí)驗(yàn)者,，注意低溫保存。

    實(shí)驗(yàn)中為了確定*信號(hào)和zui低背景應(yīng)將捕獲抗體（0.5-4μg/ml）和檢測(cè)抗體（0.25-2μg/ml）在預(yù)實(shí)驗(yàn)中進(jìn)行彼此相抗的滴定,。同時(shí),，應(yīng)包括在適當(dāng)范圍內(nèi)的標(biāo)準(zhǔn)品的系列稀釋。按試劑說明書常規(guī)提供的范圍進(jìn)行操作,。

    標(biāo)準(zhǔn)品的配制：對(duì)于每種細(xì)胞因子應(yīng)仔細(xì)閱讀說明書,，注意每批的細(xì)節(jié)。在使用細(xì)胞因子前,，瞬時(shí)離心試劑瓶,，盡可能多地收回其中的細(xì)胞因子。根據(jù)每批說明書中的細(xì)節(jié),，將凍干的細(xì)胞因子復(fù)溶,。

    一般待測(cè)抗原標(biāo)準(zhǔn)曲線的線性范圍的可通過將標(biāo)準(zhǔn)品做8次2倍系列稀釋從2000pg/ml 到15pg/ml?？衫脴?biāo)準(zhǔn)的ELISA操作流程,、放大試劑盒、第三類試劑,、或改變酶底物系統(tǒng)可在一定范圍內(nèi)提高靈敏度,。

    為了優(yōu)化靈敏度，建議放置一個(gè)晚上孵育標(biāo)準(zhǔn)品和標(biāo)本,。若使用過氧化物酶作為顯色系統(tǒng),，應(yīng)嚴(yán)禁在洗液和稀釋液中加疊氮鈉,，疊氮鈉可抑制過氧化物酶的活性。當(dāng)測(cè)定混合液體中的抗原時(shí),，如血清,，建議在標(biāo)本稀釋液中加不相干的Ig。

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