技術(shù)文章
如何選擇免疫組化實(shí)驗(yàn)中所需要的二抗
閱讀:2753 發(fā)布時(shí)間:2015-7-1免疫組化,是應(yīng)用免疫學(xué)基本原理——抗原抗體反應(yīng),,即抗原與抗體特異性結(jié)合的原理,,通過(guò)化學(xué)反應(yīng)使標(biāo)記抗體的顯色劑(熒光素、酶,、金屬離子,、同位素)顯色來(lái)確定組織細(xì)胞內(nèi)抗原(多肽和蛋白質(zhì)),對(duì)其進(jìn)行定位,、定性及定量的研究,,稱為免疫組織化學(xué)技術(shù)(immunohistochemistry)或免疫細(xì)胞化學(xué)技術(shù)(immunocytochemistry)。既然是抗體與抗原的反應(yīng),,抗體就在實(shí)驗(yàn)中顯得特別重要,,如何選擇抗體就顯得很重要,今天上海恒遠(yuǎn)與您一起分享一下如何選擇正確的二抗,進(jìn)行免疫組化實(shí)驗(yàn),。
1 種屬來(lái)源要匹配:根據(jù)所用一抗選定二抗,。一般來(lái)說(shuō),如果一抗是小鼠源性,,二抗應(yīng)選擇兔/山羊或其它種屬抗小鼠的抗體,。目前,美國(guó)Vector公司和 Zymed公司都有開(kāi)發(fā)的用小鼠抗體檢測(cè)小鼠組織的試劑盒,,即一抗來(lái)源于小鼠,,該試劑盒采用了通用非特異性封閉液和封閉內(nèi)源性小鼠Ig的封閉液,可以 得到清晰的染色背景,。
2.注意抗體同種型和亞型:確定一抗同種型和亞型后,,可以選擇抗一抗來(lái)源種屬?gòu)V譜Ig或針對(duì)一抗亞型的二抗。如一抗是小鼠IgG1,,可以選用山羊抗小鼠的Ig或IgG1的二抗,。
3.正確使用:也需要重新選擇稀釋比例。一般上海恒遠(yuǎn)會(huì)提供稀釋比例從1:10稀釋度始,,作5倍比稀釋,。
上海恒遠(yuǎn)長(zhǎng)期現(xiàn)貨供應(yīng)Abcam進(jìn)口分裝的抗體,另外上海恒遠(yuǎn)還現(xiàn)貨供應(yīng)Abcam進(jìn)口原裝的抗體到貨期短,,價(jià)格優(yōu),,公司秉承“專注品質(zhì)、信守承諾,、積極溝通,、創(chuàng)新服務(wù)"的企業(yè)文化積極參與生物領(lǐng)域的技術(shù)創(chuàng)新和技術(shù)服務(wù),力求為我國(guó)科研事業(yè)添磚加瓦,。歡迎廣大新老客戶咨詢或者咨詢我們的在線客服,。